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成功转染细胞

细胞系细胞类型物种试剂
3T3-F442A 脂肪细胞 小鼠 Lipofectamine 试剂 
SW13 肾上腺癌 人 Lipofectin 试剂 
原代 羊水细胞 人 Lipofectin 试剂 
T24 膀胱癌 人 Lipofectin 试剂 
U-2 OS 骨肉瘤 人 Lipofectamine 2000 试剂 
KG-1; KG1a; K562 白血病 人 Lipofectamine 2000 试剂 
SK-BR-3 乳腺癌 人 Lipofectamine 2000 试剂 
MCF7 乳腺癌 人 Lipofectamine 2000 试剂 
Hs 578T; T-47D; MDA-MB-231; ZR-75-1 乳腺癌 人 Lipofectamine 试剂 
C127 乳腺癌 小鼠 Lipofectin 试剂 
NMU 乳腺癌 大鼠 Lipofectamine 试剂 
HeLa 宫颈癌 人 Lipofectamine 2000；Lipofectamine 试剂 
C-33 A 宫颈癌 人 Lipofectamine 试剂 
HT-29 结肠 人癌 Lipofectamine 2000 试剂 
HCT116 结肠 人癌 Lipofectamine 2000 试剂 
COLO 320 HSR; SW40; 3SW480; Caco-2 结肠 人癌 Lipofectamine 试剂 
T84 结肠 人癌 Lipofectin 试剂 
L 结缔组织 小鼠 Lipofectamine 试剂；Lipofectin 试剂 
Isikawa 子宫内膜癌 人 Lipofectamine 试剂 
原代 HUVEC 内皮 人 Lipofectin 试剂 
原代 HUAEC 内皮 人 Lipofectin 试剂 
原代内皮 内皮 兔 Lipofectin 试剂 
P19; F9 胚胎癌 小鼠 Lipofectamine Plus 试剂 
原代成纤维细胞 成纤维细胞 人 Lipofectamine 2000 试剂 
Mv 1 Lu 肺成纤维细胞 Mink Lipofectin 试剂 
NIH 3T3; TA1; Y-2; NIH 3T6; 10T1/2 成纤维细胞 小鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂；Lipofectin 试剂 
MDCK 肾脏 犬 Lipofectamine 试剂 
BHK-21 肾脏 仓鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
293, 293H, 293F 肾脏 人 Lipofectamine 2000 试剂 
A498; UMRC 6 肾癌 人 Lipofectamine 试剂 
COS-1; COS-7; Vero CV-1 肾脏 猴 Lipofectamine 2000 试剂 
LLC-PK 肾脏 猪 Lipofectamine 试剂 
FLK 肾脏 绵羊 Lipofectamine 试剂 
原代肝脏 肝脏 犬 Lipofectin 试剂 
Huh7 肝癌 人 Lipofectamine 2000 试剂 
Hep 3B 肝癌 人 Lipofectamine 2000 试剂 
原代肝脏 肝脏 小鼠 Lipofectin 试剂 
原代肝脏 肝脏 大鼠 Lipofectamine 2000 试剂 
FTO-2B 肝癌 大鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
MSN610.2; Morris 7777; H35; McA-RH7777 肝癌 大鼠 Lipofectamine 试剂；Lipofectin 试剂 
R1610 肺 仓鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
Dede 肺 仓鼠 Lipofectamine 试剂 
MRC-5 肺 人 Lipofectamine 2000 试剂 
WI-38 肺 人 Lipofectamine 试剂 
NCI-H23 肺 人癌 Lipofectamine 试剂 
A549 肺 人癌 Lipofectamine 2000 试剂 
H187; NCI-H146 肺 人小细胞癌 Lipofectin 试剂 
LLC 肺 小鼠癌 Lipofectamine 试剂 
BL3.1 淋巴 牛白血病 Lipofectamine 试剂 
Jurkat 淋巴 人淋巴瘤 Lipofectamine 2000 试剂 
U937 淋巴 人淋巴瘤 Lipofectin 试剂 
MOLT-4 淋巴 人白血病 DMRIE-C 试剂 
A20.J; M12 淋巴 小鼠 B 细胞淋巴瘤 Lipofectamine 试剂 
P388D1 淋巴 小鼠淋巴瘤 Lipofectamine 试剂 
THP-1 巨噬细胞/ 人单核细胞 Lipofectamine 试剂 
原代；J774.16；RAW 264.7 单核细胞 小鼠巨噬细胞 Lipofectamine 试剂；Lipofectin 试剂 
B16 黑色素瘤 小鼠 Lipofectamine 2000 试剂 
气管平滑肌 肌肉 奶牛 Lipofectamine 试剂 
C2C12 肌肉 奶牛 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
原代；G8 肌肉 小鼠 Lipofectamine 试剂 
原代 肌肉 大鼠 Lipofectin 试剂 
L6E9 肌肉 大鼠 Lipofectin 试剂 
A10 平滑肌 大鼠 Lipofectamine 试剂 
U-87; A-172 胶质瘤 人 Lipofectamine 2000 试剂 
SK-N-MC 神经母细胞瘤 人 Lipofectin 试剂 
SK-N-SH 神经母细胞瘤 人 Lipofectamine 试剂 
Neuro-2a 神经母细胞瘤 小鼠 Lipofectamine 试剂 
原代胎仔星形胶质细胞 星形胶质细胞 大鼠 Lipofectamine 试剂 
C6 胶质瘤 大鼠 Lipofectamine 试剂 
PC 12 嗜铬细胞瘤 大鼠 Lipofectamine 2000 试剂 
CHO-K1 卵巢 仓鼠 Lipofectamine 2000 试剂 
CT60 卵巢 仓鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
AS52; CHO-DXB11 卵巢 仓鼠 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
SKOV3 卵巢癌 人 Lipofectamine 试剂 
原代卵巢 卵巢 小鼠 Lipofectin 试剂 
Capan-2 胰腺癌 人 Lipofectamine 试剂 
AR4-2J 胰腺 大鼠 Lipofectamine 试剂 
原代胎仔胰岛细胞 胰腺胰岛 大鼠 Lipofectin 试剂 
AtT-20 垂体 小鼠 Lipofectamine 试剂 
原代垂体 垂体 大鼠 Lipofectin 试剂 
GH3 垂体肿瘤 大鼠 Lipofectamine 试剂 
LNCaP; PC-3 前列腺 人 Lipofectin 试剂 
原代角质化细胞 皮肤 人 Lipofectamine 2000 试剂 
AKR 脾脏 小鼠 Lipofectin 试剂 
精子 精子 小鼠 Lipofectin 试剂 
原代造血 CD34+ 干细胞 人 DMRIE-C 试剂 
D3 干细胞 小鼠 Lipofectin 试剂 
SK-UT-1 子宫 人 Lipofectamine 试剂 
胚盘细胞  鸡 Lipofectin 试剂 
原代软骨细胞  鸡 Lipofectamine 试剂 
原代成纤维细胞  鸡 Lipofectamine 试剂、Lipofectin 试剂 
原代肝细胞  鸡 Lipofectin 试剂 
BMS-M 原生质体  玉米 Lipofectin 试剂 
盘基网柄菌   Lipofectin 试剂 
A6 肾细胞 非洲爪蟾 蛙 Lipofectamine（含 Plus）试剂 
鸡蛋；肾细胞 非洲爪蟾 蛙 Lipofectin 试剂 
D.Mel-2; Schneider L2 果蝇 昆虫 Cellfectin 试剂 
Sf9; Sf21; High Five™ 草地贪夜蛾 昆虫 Cellfectin 试剂 
粗糙链孢霉 粗糙链孢霉 昆虫 Lipofectin 试剂 
DGZ 原生质体  大米 Lipofectin 试剂 
原代淋巴  虾 Lipofectin 试剂 
原生质体  烟草 Lipofectin 试剂 
酿酒酵母 酿酒酵母 酵母 Lipofectin 试剂 
粟酒裂殖酵母 粟酒裂殖酵母 酵母 Lipofectin 试剂 

疑难解答

转染问题可能的原因建议的解决方案
转染效率低。 未使用合适的阳离子脂质体试剂。 选择可能会在您的细胞类型中实现出色转染效率的阳离子脂质体试剂。请参见我们的选择指南
转染效率低。 未使用合适的阳离子脂质体试剂浓度、DNA 浓度、时间或细胞密度。 在最终转染条件下优化这些参数。请参见细胞特异性转染方案。
转染效率低。 未形成 DNA-阳离子脂质体试剂复合物。 在复合物的形成步骤中请勿使用血清。Opti-MEM I 培养基或 D-MEM 是用于复合物培养的良好培养基。如果使用含有转染培养基的血清，则在无血清的情况下形成复合物。注：请勿使用含 Lipofectamine（含 Plus）试剂或用于昆虫细胞的 Opti-MEM I 培养基。Sf-900 II SFM 在 Sf9 或 Sf21 细胞中可产生出色结果。对于 D. mel-S2 细胞，使用果蝇-SFM。 
转染效率低。 存在抑制剂。 在用于制备复合物的培养基中，请勿使用抗生素、EDTA、柠檬酸盐、磷酸盐、RPMI 培养基、软骨素硫酸盐、透明质酸、硫酸葡聚糖或其他硫酸化蛋白聚糖。 
转染效率低。 阳离子脂质体被冷冻。 请勿使用冷冻过的阳离子脂质体试剂。储存于 +4°C 下。 
转染效率低。 细胞密度不正确。 转染时细胞密度应为 70% 至 90% 汇合度。（使用 Optifect™ 转染试剂时，汇合度应为 30%-70%） 
转染效率低。 转染检测时出现问题。 加入一种转染试验阳性对照。 
转染效率低。 转染后的 DNA 的启动子增强剂未被细胞类型识别。 确保转染后的 DNA 与靶细胞类型兼容。 
转染效率低。 对于 Lipofectin 试剂，未使用培养基对阳离子脂质体进行预孵育。 在加入稀释 DNA 之前 30 分钟用培养基预孵育 Lipofectin 试剂。 
转染效率低。 稀释 Lipofectamine 2000 试剂在与稀释 DNA 混合之前孵育时间过长。 对于在 Opti-MEM I 培养基中制备的稀释液，请确保稀释 Lipofectamine 2000 试剂与稀释 DNA 在 30 分钟内混合。如果使用 D-MEM 作为稀释液，应在 5 分钟内与稀释 DNA 混合。 
转染效率低。 Lipofectamine 2000 试剂转染的细胞密度过低。 使用 90% 汇合度的细胞用于 Lipofectamine 2000 试剂转染。 
细胞死亡率高（毒性） DNA 过多。 绘制剂量反应曲线，以确定合适的 DNA 量。在剂量反应转染中使用一种阳离子脂质体试剂，因为单用 DNA 对细胞生长的影响极轻微。 
细胞死亡率高（毒性） 阳离子脂质体试剂过多。 绘制剂量反应曲线，以确定合适的阳离子脂质体试剂量。在剂量反应实验中使用含阳离子脂质体试剂的 DNA，因为单用阳离子脂质体试剂对细胞生长的影响极轻微。 
细胞死亡率高（毒性） 细胞数量过少。 绘制剂量反应曲线，以确定适用于每次转染的细胞数量。根据应用效率平衡细胞数量。 
细胞死亡率高（毒性） 在不含血清的情况下细胞活力下降。 使用 Opti-MEM I 培养基。减少或省去在无血清培养基中洗涤的次数。在转染培养基中使用 5% 至 10% 血清。确保在无血清的情况下形成复合物。 
细胞死亡率高（毒性） 对于稳定转染，选择抗生素添加过快。 在加入选择性抗生素前，为细胞留出至少 48 小时来表达抗性。 
细胞死亡率高（毒性） 转染过程中使用了抗菌药剂。 转染过程中不要使用氯喹、青霉素或链霉素，因为阳离子脂质体试剂使细胞具有更高的渗透性。 
转染无法重现 转染时的汇合度发生变化。 保持转染参数（如生长的汇合度和阶段）的一致性。 
转染无法重现 细胞在培养中发生变化。 如果可能，解冻新鲜细胞或获得新的细胞系。 
阳离子脂质体试剂溶液浑浊。  对于 Cellfectin DMRIE-C 和 Lipofectamine 2000 试剂，这是正常现象。在取等份试液进行转染前，请确保混合试剂（翻转 5 至 10 次）。 
阳离子脂质体试剂溶液浑浊。  对于 Lipofectin，试剂可能被冷冻或储存于 +4°C 以下。请勿使用。 
阳离子脂质体试剂溶液浑浊。  对于 Lipofectamine 试剂，在 Opti-MEM I 中稀释后，有时会看到这种现象。这可用于转染。 
DNA-阳离子脂质体试剂复合物沉淀。 EDTA 过量。 将 DNA 溶解于水或 TE 中，稀释 DNA 中的 EDTA 浓度 <0.3 mm。 
DNA-阳离子脂质体试剂复合物沉淀。 在复合物中观察到阳离子脂质体试剂-DNA 过量沉淀。 在复合物形成过程中，确保阳离子脂质体试剂和 DNA 的浓度不超过推荐量。 
脂肪试剂沉淀。 试剂可能被冷冻或储存于 +4°C 以下。 请勿使用。 
LT076