已知 JAK/STAT3 信号转导通路由细胞因子（如 IL-6）激活。在该通路中，IL-6 与其细胞表面受体结合导致 JAK 活化，进而在特定酪氨酸残基 (Y705) 处磷酸化活化 STAT3 蛋白。LanthaScreen™ STAT3 GripTite™ 是一种组成型表达 GFP-STAT3 融合蛋白的人细胞系。已知 JAK/STAT 信号转导通路在该细胞系中功能完整；因此，GFP-STAT3 融合蛋白可作为 JAK 诱导 IL-6 磷酸化的底物。使用该细胞系，开发了一种裂解免疫检测，使用铽标记的抗 pY705-STAT3 抗体在细胞裂解物中检测到 GFP-STAT3 的磷酸化状态，以时间分辨 FRET (TR-FRET) 读数表示。

使用 Lipofectamine™ 2000 转染试剂将 GFP-STAT3 DNA 表达构建体转染至 GripTite™ HEK 293 细胞，然后用杀稻瘟菌素选择转染细胞。该细胞系是使用 GFP 荧光作为分选标志物通过流式细胞术分离的克隆群体。在优化条件下，使用 IL-6 作为 JAK 介导 GFP-STAT3 磷酸化的配体，针对 EC50 和 Z’ 因子对利用该细胞系的测定进行了验证。还在可变的实验条件（包括细胞平板接种密度、刺激时间、DMSO 耐受性和测定平衡时间）下检测了该测定。还描述了替代“混合读数”检测形式。