SuperScript™ IV CellsDirect™ cDNA 合成试剂盒

SuperScript IV CellsDirect cDNA 合成试剂盒经过优化，可直接从哺乳动物细胞裂解物中合成第一链 cDNA，而无需先分离 RNA。细胞裂解和反转录在同一试管中进行，得到的第一链 cDNA 即刻可用于 PCR 和 qPCR。

SuperScript IV 试剂盒的特点包括：
• 与在不同处理条件下生长的各种哺乳动物细胞类型兼容
• 单管形式尽可能减少了试剂损失、样品损失和处理时间
• 在第一链 cDNA 合成反应中可使用总裂解物体积，从而用有限细胞数量提供更高产量，并允许检测罕见转录本
• 生成高质量 cDNA 以供在多种应用中使用，包括 PCR 和 qPCR
• 方案简单，大约需要 37 分钟
• 与来自不同生产商的 TaqMan 和 SYBR Green qPCR 预混液兼容
• 针对 1–10,000 个细胞/样品优化了性能，结果与使用纯化 RNA 获得的结果相当

SuperScript IV CellsDirect cDNA 合成试剂盒包括 SuperScript IV 反转录酶。该酶的特点包括：
•更低的 RNase H 活性
• 更高的热稳定性
• 在第一链合成反应中产生高产量 cDNA，以便提高灵敏度并增强罕见转录本的检测
• 对各种 RT 抑制剂具有优异的耐受性

SuperScript IV 反转录酶是所有 RT-PCR 和 qRT-PCR 应用的极佳选择。这是一种专有 MMLV 突变体，在 RT 反应中具有出色的耐用性和可靠性。与 SuperScript III 反转录酶相比，在抑制剂耐受性、持续合成能力和反应速度等方面显著改善，同时保留了前代酶的所有优点，包括较高的热稳定性、高效全长 cDNA 合成以及较低的 RNase 酶活性。

工作原理
在传统的 RT-PCR 中，首先从细胞中分离出 RNA，这个程序非常耗时，会导致材料损失。使用 SuperScript IV CellsDirect cDNA 合成试剂盒，可在单管中将细胞裂解，并以尽可能少的操作量从裂解物中获得 cDNA，且无样品损失。DNase I 处理是可选步骤，可用于在第一链合成前消除基因组 DNA。该试剂盒已针对小细胞样品（从 10,000 个细胞到单个细胞不等）进行了优化。