Invitrogen™

SuperScript™ IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒

货号: 11752048
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SuperScript™ IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒

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11752048
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48 reactions
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Invitrogen SuperScript IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒可从完整的单细胞(1–1,000个)或少量总 RNA(2 pg–10 ng)直接高效合成并扩增 cDNA。其采用方便操作的预混规格,含有细胞裂解、反转录 (RT) 和 PCR 扩增所需的所有组分。优质的酶(SuperScript IV 反转录酶和 Platinum SuperFi U DNA 聚合酶)组合确保高得率、灵敏度和准确度。由于反应时间短且实操时间极短,只需两小时即可完成这种简单的单管预扩增方案。制得的高质量完整 cDNA 可用于新一代测序 (NGS) 应用或实时荧光定量 PCR 基因表达分析。

SuperScript IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒的特点包括:
极佳灵敏度 — 可从低至单个细胞或 2 pg 的总 RNA 中轻松检测低丰度靶标
高质量 cDNA — 均匀覆盖,可获得全长转录信息
简化的工作流程 — 简单的单管实验方案
节省时间 — 裂解和反转录时间短
通用 — 完整预扩增兼容 NGS 或实时荧光定量 PCR 分析的下游分析

试剂盒利用了 SuperScript IV 反转录酶的末端脱氧核苷转移酶 (TdT) 活性。捕获含 oligo(dT) 和接头序列的寡核苷酸,以用作引物从含多聚腺苷酸的 RNA 选择性合成第一链 cDNA。反转录酶到达 RNA 模板的 5‘ 端时,TdT 活性在 cDNA 端增加 1–3 个额外核苷酸,从而在制得的 cDNA 的 3‘ 端完成模板转换并无连接掺入接头序列。SuperScript IV 反转录酶兼具高灵敏度和模板转换效率,可捕获超低丰度的靶标。

在后续 PCR 扩增步骤中,在 cDNA 两端掺入的接头序列可作为引物结合位点,从而完整预扩增全长模板。随附的 Platinum SuperFi U 预扩增预混液含有一种超高保真 DNA 聚合酶,可确保高效扩增长链模板(长达 10 kb)且无 PCR 引起的偏倚或错配。

规格

产品规格
试剂盒
GC-Rich PCR Performance
聚合酶
Platinum SuperFi U DNA 聚合酶
反应速度
30 min。
技术
Reverse Transcription, Preamplification
最佳反应温度
50°C
逆转录酶
SuperScript IV
运输条件
干冰
适用于(应用)
二代测序(NGS), 实时 PCR (qPCR)
最终产品类型
PCR Amplified cDNA
反应次数
48 次反应
试剂类型
反转录
尺寸(最终产品)
长达 10 kb
原始材料
细胞或 RNA

内容与储存

• 10X 裂解缓冲液 (48 μL)
• RNase 抑制剂 (19 μL)
• 捕获寡核苷酸 (48 μL)
• 4X SuperScript IV cDNA 合成预混液 (240 μL)
• 模板转换寡核苷酸 (48 μL)
• 2X Platinum SuperFi U 预扩增预混液 (2 x 1.2 mL)
• 预扩增引物 (48 μL)
• 无核酸酶水 (2 x 1.25 mL)

储存在 –25°C 至 –15°C 下。

图表

文件和下载

证书

    常见问题解答 (FAQ)

    引用和文献

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