pOptiVEC™-TOPO™ TA Cloning™ 试剂盒

OptiCHO™ Express 试剂盒设计用于悬浮培养中的二氢叶酸还原酶缺陷型 (DHFR^-) 中国仓鼠卵巢 (CHO) DG44 细胞的高效生长和转染。该试剂盒提供了一个完整的工作流程方案以及在无血清环境下有效转染 DHFR^- DG44 细胞及后续稳定细胞系开发中的必要组分，包括：
• pOptiVEC™-TOPO™ 载体 - 双顺反子克隆载体，包含在 CHO-DG44 细胞中开发稳定细胞系所需的 DHFR 基因（图 1）；该载体可适应 TOPO™，能够以 >85% 的效率克隆包含目标基因的 PCR 产物
• FreeStyle™ MAX 转染试剂 - 非动物源性成分的转染试剂，可提供较高的转染效率和一致的结果
• CD OptiCHO™ 培养基 - 化学成分明确的无蛋白培养基（不含次黄嘌呤或胸苷），专门设计用于重组 CHO-DG44 细胞的高密度悬浮细胞培养和分泌性蛋白的生产
• CD DG44 培养基 - 化学成分明确的无蛋白培养基，补充有次黄嘌呤和胸苷，支持 DG44 细胞在悬浮培养中的较优生长
• DG44 细胞 - 经预适应可用于 CD DG44 培养基，并经过选择以获得卓越的细胞生长和转染效率

此外，OptiCHO™ Express 试剂盒提供 GIBCO™ OptiPRO™ SFM 以促进 DNA-脂质复合物的形成，提供 L-谷氨酰胺（单独提供，以增加培养基的稳定性）和 Pluronic™ F-68 以控制悬浮培养物中的剪切力。

储存：
在 15°C 至 30°C 下储存 Pluronic™ F-68。将 CD DG44 培养基、OptiPRO™ SFM、CD OptiCHO™ 培养基和 FreeStyle™ MAX 转染试剂置于黑暗环境中储存在 2°C 至 8°C 下。将 L-谷氨酰胺、pOptiVEC™-TOPO™ 载体、CMV 正向测序引物和 EMCV IRES 反向测序引物储存在 -5°C 至 -20°C 下。将 One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌细胞储存在 -80°C 下。将 DG44 细胞储存在液氮中。