T4 DNA 连接酶利用 ATP 的能量在双链 DNA 之间催化 3´ 羟基端和 5´ 磷酸端形成磷酸二酯键。这种独特的 T4 DNA 连接酶缓冲液优化了连接反应，使其在 5 分钟内即可完成 (1)。单链核酸不是这种酶的底物。提供 T4 DNA 连接酶技术公告。

应用：克隆（平末端或粘性末端连接）(2)。向平末端 DNA 添加连接子或接头 (2)。

来源：从大肠杆菌œ溶素原 NM989 纯化而来。

性能和质量检测：脱氧核糖核酸内切酶、3´ 和 5´ 脱氧核糖核酸外切酶分析；经过连接效率检测。

单位定义：一个单位的酶量可于 37°C 下在 20 min 内催化 1 nmol ³²P 标记的焦磷酸盐转化成 ATP。（一个单位相当于约 300 个粘性末端连接单位。）

单位反应条件：66 mM Tris-HCl（pH 值 7.6）、6.6 mM MgCl₂、10 mM DTT、66 µM ATP、3.3 µM 32 P 标记的焦磷酸盐和 0.1 mL 酶，37°C 下 20 min。