适用于 RT-PCR 的 SuperScript™ IV 第一链合成系统经过优化,以从纯化 poly(A)+ 或总 RNA 中合成第一链 cDNA。试剂盒包括
SuperScript™ IV 反转录酶 (RT),这是一种专有 MMLV 突变体,可在 RT 反应中产生稳健可靠的 cDNA 合成。SuperScript™ IV 合成系统相比基于 SuperScript™ III 的系统在抑制剂耐受性、合成性和反应速度等方面得到了很大提高,同时保留了前代系统的所有优点,包括较高的热稳定性、高效全长 cDNA 合成以及较低的 RNase 活性。在多种样品中存在可导致其他当前可用 RT 效率低下的抑制剂的情况下,SuperScript™ IV 系统仍能提供可靠、一致和快速的 cDNA 合成。
SuperScript™ IV 第一链合成系统包含 RT 反应所需的所有组分,以及一种其它对照基因和相关引物,同时为您提供定制 RT 设置的灵活性,以满足您的应用需求。SuperScript™ IV 合成系统是实现 RT-PCR 应用高性能和灵活性的首选。我们推荐将其用于所有 RT-PCR 应用,尤其是当重现性和可靠性成为主要考虑事项,以及 RNA 样品中的抑制剂可能干扰 cDNA 合成,进而导致基因表达研究出现偏倚时,我们推荐使用这款产品。
SuperScript™ IV 第一链合成系统的特性包括:
•显著提高了对各种可能干扰 cDNA 合成的抑制剂的耐受性
• 能在各类样品中进行可靠、特异的 cDNA 合成
• 反转录酶反应更快,将孵育时间从 >50 min 缩短至 10 min
• 持续合成能力明显优于 SuperScript™ III RT
酶来源从表达 M-MLV pol 基因的大肠杆菌中提纯制成,并经过改良提高了热稳定性和半衰期、合成性、抑制剂耐受性,降低了 RNase H 活性。
性能和质量检测脱氧核糖核酸内切酶、脱氧核糖核酸外切酶及核糖核酸酶分析;cDNA 产物的得率和长度。
单位定义一个单位的 SuperScript™ IV RT 是指在 37°C 下使用多聚腺苷酸 (A) 寡核苷酸 (dT)
12-18 作为模板/引物,将 1 nmole 脱氧核糖核酸在10分钟内掺入酸可沉淀材料所需要的酶量。
单位反应条件50 mM Tris-HCl(pH 值 8.3)、4 mM MgCl
2、10 mM DTT、50 mM KCl、0.5 mM dTTP、0.4 MBq/mL [
3H]-dTTP、0.4 mM 多聚腺苷酸 (A) 寡核苷酸 (dT)
12-18 和酶,20 μL,37°C 下 10分钟。