Thermo Scientific Pierce 考马斯亮蓝染料由一种形式较为常见的考马斯染料组成,这种染料是各种比色蛋白凝胶染色剂的关键组成部分。考马斯 R-250 和 G-250 染料是二磺化三苯基甲烷化合物的两种化学形式,通常在蛋白凝胶电泳检测和 Bradford 法蛋白定量试剂中作为基础染料。R-250(红色)形式缺少两个在 G-250(绿色)形式中存在的甲基,这也称为胶体考马斯染料。
考马斯 R-250 和 G-250 染料是二磺化三苯基甲烷化合物的两种化学形式,通常在蛋白凝胶电泳检测和 Bradford 法蛋白定量试剂中作为基础染料。R-250(红色)形式缺少两个在 G-250(绿色)形式中存在的甲基,这也称为胶体考马斯染料。
通常,考马斯凝胶染料和蛋白定量试剂配制为 25% 至 50% 甲醇中的高酸性溶液。在酸性条件下,染料主要通过碱性氨基酸(主要是精氨酸、赖氨酸和组氨酸)与蛋白结合,并且结合到每个蛋白分子上的考马斯染料配体的数量大致与蛋白所带正电荷的数量成正比。蛋白结合会导致染料从红棕色变为亮蓝色(最大吸光度在 595 nm 处)。
其特性包括:
•易于检测—与蛋白形成颜色鲜艳的复合物
• 高灵敏度—可以测定凝胶基质中含量低至 0.5 µg/cm2 的蛋白
• 染色可逆—在酸性染色介质中形成的考马斯亮蓝染料阴离子通过静电相互作用与蛋白的质子化氨基结合;生成的复合物在适当条件下是可逆的
• 可区分结合染料与未结合染料—当溶于 pH 值为3.0的 0.01 M 柠檬酸盐缓冲液时,在 555 nm 处具有最大吸光度;蛋白-染料复合物的特征是峰比游离染料的峰稍宽,最大吸光度在 549 nm 处
仅供科研使用。不可用于诊断程序。