Easy-Titer™ 人 IgG（γ 链）检测试剂盒

Thermo Scientific Easy-Titer 人 IgG（γ 链）检测试剂盒包括抗体敏化的微球，用于使用标准微孔板和 UV-Vis 微孔板读数仪（分光光度计）通过简单快速的微凝集技术测量抗体的特定浓度。该试剂盒对人 IgG γ 链具有特异性，且与总蛋白检测不同，它可特异性测量含有其他蛋白的样品（例如血清、血浆、培养物上清液）中的靶抗体浓度。该试剂盒灵敏，只需极少样品量。根据检测响应（吸光度），通过与使用已知抗体样品（单独出售）稀释液制备的标准曲线进行比较，确定抗体浓度。

Easy-Titer 抗体检测试剂盒的一般特点：

•基于抗体的特异性—测量样品中靶抗体（而不仅仅是总蛋白）的浓度；无需纯化抗体即可评估浓度
• 与 ELISA 相比更快且更简单—三组分均相检测；总孵育时间仅需10分钟
• 无需特殊设备—使用标准涡旋混合器、移液器、96孔微孔板、板振荡器和读数仪（测量 340 nm 或 400 nm 处的吸光度）
• 灵敏—测定范围（标准曲线）8至 500 ng/mL；使用15至 300 ng/mL 的样品可获得理想结果
• 可重现—变异系数小于 5%；误差取决于稀释和移液技术
• 抗体标准品单独销售—关于推荐的产品，请参见产品列表；使用任何具有正确靶标同一性和已知浓度（大于 10 µg/mL）的抗体标准品
• 适用于五种常用靶标的试剂盒—选择适用于特定物种和免疫球蛋白类别的特异性试剂盒；与其他物种和类别的靶抗体类别不发生交叉反应

Easy-Titer 测定试剂盒根据使用特异性抗 IgG 或 IgM 多克隆抗体包被（“敏化”）的微球的凝集反应，检测和测量特异性靶抗体。在适当的水性缓冲液（试剂盒中提供）中，单分散抗体包被微球（> 1 µM 直径）对波长 (340 nm) 约为直径一半的入射光具有极高吸收率 (λ-max)。加入样品时，两个或多个微球通过其包被的特异性多克隆抗体与各抗体靶标结合，且这种凝集反应有效地形成更大的表观微球，导致吸收率成比例降低（吸光度降低）。

典型的微凝集试验依赖于光散射的变化和透射率的相应变化（与吸光度呈负相关）。Easy-Titer 检测试剂盒采用特殊的稀释缓冲液，其折射系数可消除单分散性微球上光散射对测定用波长的影响。因此，必须使用试剂盒中提供的稀释缓冲液对检测中使用的样品进行最终 10 至 20 倍稀释。

Easy-Titer 抗体检测与 ELISA 相比更快且更简单：
• 使用试剂盒中的稀释缓冲液稀释纯化的抗体进行标准品（5 至 500 ng/mL）的制备。
•通过在稀释缓冲液中稀释至测定范围（8 至 500 ng/mL）内，制备样品。
•涡旋装有微球珠的样品瓶以形成均相悬浮液。
•用移液器将 20µL 微珠悬液和样品及标准品各 20µL 转移到 96 孔微孔板孔。
•在充分混合下对微孔板进行 5 分钟孵育。
•添加 100 µL 试剂盒中的封闭试剂。
•在充分混合下对微孔板进行 5 分钟孵育。
•在标准微孔板读数仪上测量吸光度（340 nm 或 405 nm）。
•绘制标准曲线，用插值法确定样品浓度。

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