Thermo Scientific HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持相,带有二价镍电荷 (Ni
+2),可专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。
HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖的特点:
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高容量— 在 300 cm/小时线性流速下,每 mL 树脂可结合超过 20 mg His 标签 GFP
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高纯度— 用于对裂解物进行纯化时,洗脱组分的纯度可达 80% 以上
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通用— 可用于在天然或变性条件下纯化蛋白
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稳健— 高度交联的微珠,可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速
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兼容— 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性
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高性价比— 价格极具竞争力的树脂,经多次清洗和重复利用后仍保持稳定
HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂,在中等规模或大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学剂和 pH 值环境下均保持稳定,适用于常见的原位清洁流程。与固定化金属亲和色谱 (IMAC) 所使用的钴及其他配体相比,镍对 His 标签蛋白具有更高的纯化能力。HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖在一系列的流速下都表现出较高的动态结合容量,因此是大型纯化作业的极佳之选。
应用:•对多聚组氨酸标签蛋白进行中等规模至大规模 FPLC 纯化
亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。在这类纯化方法中,有一种是将多聚组氨酸标签结合到二价金属阳离子上,此金属阳离子则是由固定在磁珠支持相上的螯合剂进行协调。当对 His 标签蛋白进行固定化金属亲和色谱 (IMAC) 纯化时,微珠、螯合剂以及固定金属的类型将会影响这些纯化操作的纯度、得率以及流速性能。
HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖是一种由次氮基三乙酸 (NTA) 修饰的 Superflow 6 支持物,带有二价镍电荷 (Ni+2),专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行 FPLC 纯化。若要验证树脂的性能,请在 100 L 反应体系内过度表达 6xHis-GFP,然后分段收集细胞团块。使用 2 L 补充 Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂(产品编号:78439)的裂解缓冲液对一部分生物体团块 (240 g) 进行裂解。净化裂解产物,然后将其分为两份。然后,在两个等效的 200 mL 微珠填充柱中,分别使用 HisPur Ni-NTA Superflow 琼脂糖以及一种主要竞争者树脂对靶蛋白进行纯化。两种树脂的总得率、回收率以及纯度 (>80%) 均非常接近,在不到 3 个小时的时间内纯化了 4 克以上的靶蛋白。
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