Thermo Scientific Pierce 谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖树脂由高度交联的 6% 微珠状琼脂糖以及固定在凝胶上的谷胱甘肽共同组成,可专门用于对 GST 标签蛋白进行高纯度、大规模纯化。
谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖的特点:
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高动态结合能力 – 在 150 cm/小时线性流速下,每 mL 树脂可结合 10 mg 纯 GST;在 30 cm/小时流速下,结合能力可超过 20 mg/mL
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高纯度 – 当用于纯化裂解物中的过表达 GST 或 GST 融合蛋白时,可确保产物纯度达 90% 以上
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稳健 – 高度交联的 6% 琼脂糖 Superflow 微珠状载体可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速
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兼容 – 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性
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高性价比 – 本树脂经多次清洗和重复利用后仍保持稳定
Pierce 谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂,在中等规模至大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学和 pH 值环境下均保持稳定,适用于常见的就地清洗流程。谷胱甘肽与 GST 标签的特异性结合使得纯化过程一步到位,而且纯度高、得率大。
应用:• 对 GST 标签蛋白进行中等规模至大规模 FPLC 纯化
亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。一种比较常用的重组蛋白纯化方法是利用谷胱甘肽 S 转移酶 (GST) 将靶蛋白表达成融合蛋白,然后通过 GST 和谷胱甘肽(固定在微珠状载体上)之间的高强度、高特异性相互作用纯化融合蛋白。
Pierce 谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖可在中等流速或高流速下对 GST 融合蛋白进行高纯度纯化。谷胱甘肽通过中央巯基基团上的一个12原子间隔臂固定在高度交联的 6% 珠状 Superflow 琼脂糖凝胶上。为了验证树脂的性能,使用 48L 反应体系过表达和纯化 GST。使用 1.7 L 裂解缓冲液裂解含过表达量 GST 的生物体团块 (170 g)。通过离心来纯化裂解物,然后将其分为两份。然后,在两个等效的 200 mL 微珠填充柱中,分别使用 Pierce 谷胱甘肽 Superflow 琼脂糖以及另一主要供应商的树脂对靶蛋白进行纯化。两种树脂的总得率、回收率以及纯度 (>95%) 均非常接近。
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