Pierce™ 免疫共沉淀试剂盒

Thermo Scientific Pierce 免疫共沉淀试剂盒提供共价抗体固定化以及进行适当控制的 co-IP 实验所需的所有组分，成品中无抗体干扰。

Co-IP 是研究蛋白:蛋白相互作用的常用方法，其使用抗体对抗原（诱饵蛋白）进行免疫沉淀，对任何相互作用蛋白（猎物蛋白）进行免疫共沉淀。使用蛋白 A 或 G 的传统 co-IP 方法可导致抗体重链和轻链的共洗脱，而这些重链和轻链可能与相关条带共迁移，掩盖了重要的结果。Pierce Co-IP 试剂盒通过将抗体共价偶联至胺反应性树脂上，解决了该问题。该试剂盒包含用于蛋白结合和回收的优化缓冲液、进行对照实验所需的试剂以及高效离心柱和收集管，可缩短方案并尽量减少操作和混合。

免疫共沉淀试剂盒的特点：

•适用于任何纯化抗体—使用任何纯化抗体进行 co-IP 实验，无论物种或 Ig 类别（鸡 IgY、人 IgE、小鼠 IgG1、IgM 等）如何；不依赖蛋白 A 和蛋白 G 的亲和结合
• 无抗体干扰—共价结合方法和非还原洗脱系统可以产生纯 co-IP 产品，该产品不会被 IP 抗体污染
• 可重复使用的抗体微珠—共价抗体固定化允许重复使用制备的 IP 树脂，并可能节省昂贵抗体
• 全套试剂盒—所有用于抗体固定和许多 IP 实验的试剂，包括结合和洗涤缓冲液、洗脱缓冲液和便利的微量离心柱，使树脂操作更加简单和高效。
•随附对照微珠—提供未衍生化琼脂糖微珠，用作非特异性结合的阴性对照
• 通用—co-IP 方法与任何生理（非变性）蛋白样品缓冲液兼容，缓冲液与特异性抗体抗原和蛋白相互作用复合物兼容。

免疫共沉淀 (Co-IP) 是一种用于发现蛋白相互作用的常用体外方法。Pierce 免疫共沉淀试剂盒经过配置，是有效进行 Co-IP 实验的基本工具，能够产生不含棘手的 IP 抗体的纯 IP 和 co-IP 产物。通过使用可直接且永久偶联纯 IP 抗体的 AminoLink Plus 树脂替代蛋白 A/G 琼脂糖微珠，对传统 co-IP 技术实现这种改善。温和（非还原、非变性）洗脱缓冲液可实现在保留琼脂糖微珠上固定化抗体的同时解离 IP 靶标。结果是获得一种可通过 Western 印迹（或甚至测序）进行分析的纯产物，无抗体干扰。

除消除 IP 抗体污染外，构成 Pierce Co-IP 试剂盒的抗体偶联方法还可避免传统蛋白 A 和蛋白 G 方法产生的非特异性结合相互作用和浸出污染。尽管偶联方法要求起始抗体包含在不含 BSA、明胶和其他贮藏蛋白稳定剂的无胺缓冲液中，但其不依赖于蛋白 A 或蛋白 G 这一事实意味着任何抗体种类或类别均可用于 IP（例如，IgM 和鸡 IgY）。实际上，任何纯化的蛋白都可以固定化用于结合配偶体的亲和纯化。