Pierce™ 生物素化重组蛋白 G

在蛋白免疫印迹、ELISA、IHC 和其他免疫检测方案中使用 Thermo Scientific Pierce 生物素化重组蛋白 G 探查和检测小鼠和人抗体（特别是 IgG 同种型）。

重组蛋白 G 的特点：

•每个蛋白含有两个 Fc 结合结构域
• 对于小鼠（包括 IgG1）、人（包括 IgG3）和大鼠、山羊和牛抗体，优于蛋白 A
• 对于豚鼠、猪、狗和猫，弱于蛋白 A
• 不结合人 IgM、IgD 或 IgA

蛋白质 G 是一种从 G 群链球菌中分离得到的细菌细胞壁蛋白。天然蛋白 G 的 DNA 测序可鉴定两个 IgG 结合结构域以及白蛋白和细胞表面结合位点。白蛋白和细胞表面结合结构域已从重组蛋白 G 中消除以减少非特异性结合，因此，可用于从粗样品中分离 IgG。理想结合发生在 pH 5条件下，尽管在 pH 7.0 - 7.2条件下结合也有效。

重组蛋白 G 的性质：
• 来源：大肠杆菌
• 分子量：∼21,600（使用 SDS-PAGE 测量的表观 MW：32,000）
•形式：无盐粉末
• 0.1% 溶液的 A280：1.0
• 等电点 (pI)：4.5

由于对于大多数哺乳动物 IgG，蛋白 G 比蛋白 A 具有更高亲和力，它可用于纯化不能与蛋白 A 很好结合哺乳动物 IgG。蛋白 G 与多个 IgG 亚型（如人 IgG3、小鼠 IgG1 和大鼠 IgG2a）结合的容量明显高于蛋白 A。但是，蛋白 G 不与人 IgM、IgD 和 IgA 结合。蛋白 A 和蛋白 G 之间的结合特性差异可通过各个蛋白的 IgG 结合位点的不同成分加以解释。这些蛋白的三级结构非常相似，尽管它们的氨基酸成分显著不同。

报告的 IgG 与蛋白质 G 的结合特性存在不一致。蛋白 G 的分离和生产方法差异可能影响 IgG 结合，部分原因是在不同来源的蛋白 G 上存在不同数量的 IgG 结合位点。已使用天然蛋白 G 和多种不同的重组形式进行了结合研究。已使用几种测定方法来确定相对亲和力，包括放射标记实验和 ELISA 技术。亲和测定的不同或许可以解释部分的不一致。此外，使用不同的缓冲液时，会有明显的结合差异。与20 mM Tris 缓冲液 (pH 7.5) 相比，当使用蛋白 G 结合缓冲液时，与蛋白 G 结合的大鼠血清 IgG 约增加 44%。

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