Thermo Scientific AminoLink 还原剂(氰基硼氢化钠)促进含醛分子和含胺分子之间的稳定键形成,从而实现蛋白和其他分子的有效标记、偶联和固定。羰基(如醛、酮和乙二醛)与氨基自发反应,形成与其游离形式相平衡的席夫碱中间体。相互作用取决于 pH 值,在酸性条件下更有效,特别是在高 pH 值下。向形成席夫碱的反应中添加 AminoLink 还原剂会导致不稳定席夫碱中间体完全还原为化学稳定键。与硼氢化钠不同,氰基硼氢化钠具有足够的温和性,可避免醛被反向还原为非反应性羟基。
羰基与伯胺基的总体反应(使用氰基硼氢化钠)称为还原性胺化。通过还原性胺化将含胺生物分子固定在含醛固相支持物上,用于生成抗体和其他分子亲和纯化的基质。为通过还原性胺化作用偶联糖蛋白,必须使用偏高碘酸钠氧化多糖基团中的糖,以生成反应性醛基。用偏高碘酸钠处理糖蛋白通常会生成足够的醛基,用作与含胺分子或含酰肼分子高效偶联的靶标,包括其他蛋白、生物素试剂和荧光标记。由于糖蛋白含有其自身的伯胺基,可能发生氧化蛋白的聚合,除非在反应中加入足够摩尔过量的预期含胺靶分子。
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