Pierce™ IgM纯化试剂盒

Thermo Scientific Pierce IgM 纯化试剂盒是一种易于使用的亲和基质和缓冲液系统，可纯化小鼠腹水液体中的 IgM；该方法使用固定化甘露聚糖结合蛋白，其在试剂盒提供的缓冲液中与 IgM 结合。

Pierce MBP 琼脂糖是纯化甘露聚糖结合蛋白（也称为甘露糖结合外源凝集素，MBL），固定在 4% 微珠状琼脂糖上。当与经过优化的缓冲液体系结合使用时，树脂与小鼠IgM可发生温度和钙依赖性结合。该树脂可从小鼠腹水和其它浓缩样品中与小鼠IgM产生特异性亲和，从而从上述样品中纯化出小鼠IgM。树脂和必需缓冲液可单独提供，也可在含 MBP 琼脂糖预填充 5 mL 柱的完整 IgM 纯化试剂盒中一同提供。

IgM 纯化试剂盒的特点：

•固定化 MBP – 基于甘露聚糖结合蛋白 (MBP) 的亲和系统可特异性纯化腹水液体中的小鼠 IgM，或部分分离血清中的人 IgM
• 全套试剂盒 – IgM 纯化试剂盒包含预填充 MBP 柱和即用型缓冲液，每次使用柱时可从 0.5 mL 腹水样品中便利地纯化至少 1.5 mg IgM
• 温和条件 – 非变性、近中性缓冲液条件，可确保功能抗体的回收
• 可重复使用 – 稳定的配体和树脂可再生且可重复使用至少 10 次，而不会使结合容量显著下降

甘露聚糖结合蛋白 (MBP)，也称为甘露糖结合外源凝集素 (MBL)，是一种在肝脏中产生并出现在血清中的哺乳动物外源凝集素。MBP 包含 18 个相同的亚单位，每个分子质量约为 31 kDa。该蛋白能够启动碳水化合物介导的补体活化。

基于固定化 MBP 的 IgM 纯化试剂盒方案对于纯化腹水液体中的小鼠 IgM 较为有效，尽管也能够部分纯化血清中的人 IgM。其结合和洗脱步骤具有温度和钙依赖性。于 4°C 下在含 20 mM 氯化钙的 Tris 缓冲液中进行结合和洗涤步骤。在室温下，在含有EDTA但不含CaCl2 Tris 缓冲液中进行洗脱。该简单方案易于使用，能从腹水中得到 90% 纯度的小鼠 IgM。固定化 MBP 可再生至少 10 次，而结合容量不会发生明显损失。人IgM 也可与支持物结合，但其结合力稍低，并且会发生 IgG 的共纯化。尚未检测或验证该纯化系统是否能与其他物种和来源的样品配合使用。

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