Pierce™ 偶联物纯化试剂盒

Thermo Scientific Pierce 偶联物纯化试剂盒是一种温和的亲和色谱系统，用于标记后从未反应酶中纯化辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase，以下简称 HRP）或碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，以下简称 AP）偶联抗体。

偶联物纯化试剂盒的特点：

•对 IgG 具有特异性—试剂盒专为从 IgG 抗体中去除 HRP 或 AP 酶而设计；不适用于 IgM、IgY、Fab 片段或链霉亲和素偶联物
•完整试剂盒—包括纯化 HRP 和 AP 偶联物所用的亲和柱、活化剂和洗脱缓冲液、脱盐柱和储存缓冲液
•大容量—柱式试剂盒一次可纯化含 0.5-50 mg 抗体的 Tris 缓冲液
•改善分析性能—从抗体偶联物中去除未结合的酶通常可降低背景，从而提高免疫测定的整体性能。

本偶联物纯化试剂盒用于抗体-酶偶联反应后，从标记的抗体 (IgG) 中去除过量的非偶联 HRP 或 Alk-Phos 酶。金属螯合琼脂糖树脂柱可结合 IgG 酶偶联物，同时使游离酶（HRP 或 AP）通过。温和的非变性洗脱缓冲液可回收具有完全活性的 IgG-HRP 或 IgG-AP 偶联物。内含的脱盐柱将纯化的偶联物交换到所选的缓冲液中，可用于多种免疫检测方法。

在本试剂盒程序中，镍螯合琼脂糖可结合 IgG Fc 区 Cγ2 和 Cγ3 结构域交界处的组氨酸簇，该结构在所有哺乳动物 IgG 中高度保守。镍螯合树脂适用于结合绵羊、小鼠、山羊、大鼠和兔的纯化 IgG。抗生物素蛋白或链霉亲和素酶偶联物不能通过该方法纯化，因为它们不与镍螯合琼脂糖结合。此外，本试剂盒不能用于从血清中纯化抗体，因为其他血清蛋白也会与镍柱结合。

使用本试剂盒去除非偶联酶，可以改善检测结果。当检测系统中不存在游离酶时，可更容易地实现高灵敏度检测、缩短清洗和孵育时间以及高信噪比。此外，亲和柱还可以浓缩稀释溶液中的偶联物，优化试验。