NHS-荧光素是一种荧光素染料的胺反应性衍生物,具有广泛的分析应用,可作为抗体和其他探针的标记,用于荧光显微镜检查、流式细胞分析和免疫荧光测定(如 Western 印迹和 ELISA)。NHS-酯或异硫氰酸盐在伯胺(赖氨酸侧链)处有效标记抗体和其他纯化蛋白
NHS-荧光素的特性:
•别名:5/6-FAM SE
• 化学名称:5/6-羧基荧光素琥珀酰亚胺酯
• 分子量:473.4
• 激发源:488 nm 光谱线,氩离子激光
• 激发波长:494 nm
• 发射波长:518 nm
•消光系数:> 70,000 M
-1cm
-1• CAS 号:117548-22-8
•纯度:> 90%(通过 HPLC)
•溶解性:可溶于 DMF 或 DMSO
• 反应性基团:NHS 酯与伯胺在 pH 值 7.0 至 9.0 下反应
NHS-荧光素通过
N-羟基-琥珀酰亚胺-酯(
NHS 酯)官能团活化。与 FITC 相比,NHS-酯衍生物在存在其他亲核试剂的情况下对伯胺具有更高的特异性,并在标记后产生更稳定的键。Pierce 胺反应性荧光素染料是具有与底部环的 5- 和 6-位置连接的反应性基团的异构体混合物。这些异构体的特性在激发和发射光谱方面无法区分,对于蛋白应用,不需要分离特定异构体。
应用• 标记抗体用作免疫荧光探针
•标记寡核苷酸用作杂交探针
• 检测凝胶和 Western 印迹中的蛋白
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