Thermo Scientific Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白是巯基反应性卵清蛋白 (OVA),适用于与含有半胱氨酸的肽和其他巯基化抗原发生半抗原-载体偶联。
Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白的特点:
•马来酰亚胺活化卵清蛋白,在包含稳定剂的 PBS(pH 值 7.2)中以冻干形式提供
• 用 5 至 15 摩尔马来酰亚胺/摩尔卵清蛋白进行活化
• 适用于偶联含半胱氨酸的肽抗原,从而形成免疫原或筛选靶标
• 在 2 小时内完成偶联反应;得到稳定的共价硫醚键
• 分子质量为 45,000 道尔顿的单一多肽蛋白
• 含有 14 个天冬氨酸和 33 个谷氨酸残基,其中的羧基导致 OVA 呈净负电荷 (pI 4.63)
• 免疫原性不及钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH),但更易溶于 DMSO(二甲基亚砜),适用于需要此溶剂的应用
• 在将 KLH 作为载体蛋白用于产生抗半抗原的免疫应答后,用作不相关蛋白载体进行抗体筛选和免疫检测
本产品由纯化的载体级卵清蛋白组成,使用 SMCC 交联剂对这一纯化的载体级卵清蛋白进行了改良,以在肽和其他分子的半胱氨酸残基上连接能够与巯基 (-SH) 部分形成共价交联的马来酰亚胺基团。利用所设计的具有末端半胱氨酸残基(作为精确偶联点)的肽抗原,可轻松制备免疫原。每一载体蛋白分子可连接多种抗原分子,而不会通过交联肽序列中的伯胺或羧酸盐而封闭预期抗原决定簇。
载体蛋白是能够在注射后刺激免疫应答的大型复杂分子。成功的生产出特异针对小抗原的抗体(例如:肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价交联于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够与载体达到足够水平的偶联,选择载体蛋白。
卵清蛋白 (OVA) 是鸡蛋清中最丰富的蛋白,它是一种适用于实验室中各种用途的便利蛋白。该 45 kDa 蛋白足够大且足够复杂,使其具有轻度免疫原性。因此,OVA 可用作载体蛋白与半抗原及其他抗原偶联,使后者更具免疫原性,用于免疫接种。即使不常用于制备第一免疫原,OVA 也作为一种普遍使用的载体蛋白用于生成更适合对使用 KLH 或其他更具免疫原性的载体蛋白产生的抗体进行分析(例如涉及涂板的筛选测定)的抗原。
Imject 卵清蛋白的免疫原性不及其他蛋白(钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH))。然而,OVA 的独立结构使其特别适于作为那些本身在典型筛选测定(如 ELISA)中难以操作的肽和其他小抗原的载体。虽然与 BSA 相比更具疏水且在水性缓冲液中的可溶性更低,但卵清蛋白在高达 70% 的 DMSO 中仍具有可溶性,使其适用于与需要 DMSO 进行溶解的半抗原偶联。卵清蛋白含有大量伯胺,其中一些经修饰后形成马来酰亚胺活化卵清蛋白。
相关产品Imject ™ 卵清蛋白(包含在 PBS 中)