Thermo Scientific Pierce EDC 是羧基和胺反应性零长度交联剂。EDC 首先与羧基发生反应,形成胺反应性 O-酰基异脲中间体,该中间体可与氨基快速反应形成酰胺键,释放异脲副产物。中间体在水性溶液中不稳定,因此两步偶联程序依赖于 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 进行稳定。如果不与胺发生反应,将导致中间体的水解、羧基的再生和 N-取代尿素的释放。副反应是形成 N-酰脲,通常仅限于位于蛋白疏水性区域的羧基。
Thermo Scientific No-Weigh 产品是可提供预分装规格的特殊试剂。预称重的包装可消除重复开瓶和关盖,从而防止随时间推移试剂反应性的降低和污染。对于这种规格,可每次使用一小瓶新鲜试剂,消除了对少量试剂进行称重的麻烦,并减少了对试剂稳定性的担忧。
EDC 的特点:
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反应性基团:
碳二亚胺•
反应靶标:活化羧基与氨基(伯胺)偶联
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多种偶联策略—将 EDC 单独与靶标基团反应,或包括
NHS 或
磺基-NHS,以提高反应效率或稳定活性中间体,用于后续胺类反应
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中性键—在羧基和胺之间形成中性酰胺键
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水溶性试剂—在水性生理缓冲液中直接加入进行反应
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可溶性反应副产物—使用水或稀释酸洗涤即可轻松去除
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高纯度结晶试剂—用于生成高质量、活化的衍生物
EDC 的属性• 分子式:C
8H
17N
3·HCl
• 分子量:191.7
•间隔臂长度:0 Å
• 货号:25952-53-8
• 反应基团:
碳二亚胺• 反应性:在 pH 值为 4.7–6.0(较优)的条件下与羧基形成活性中间体,然后中间体与伯胺发生反应
1-乙基-3[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐(EDC 或 EDAC)是一种零长度交联剂,用于将羧基偶联至伯胺。该交联剂已用于多种应用,如在肽合成中形成酰胺键、连接半抗原与载体蛋白形成免疫原、通过 5' 磷酸基标记核酸以及构建生物分子的胺反应性 NHS 酯。EDC 与羧基反应,形成胺反应性
O-酰基异脲中间体。如果这种中间体不遇到胺,它将水解并再生羧基。在存在
N-羟基磺基琥珀酰亚胺(磺基-NHS)的情况下,EDC 可用于将羧基转换为胺反应性磺基-NHS 酯。这是通过将 EDC 与含有羧基的分子混合并添加磺基-NHS 来实现的。
应用:• 偶联肽和蛋白间的羧基与氨基基团
• 偶联半抗原与免疫原性载体蛋白(如
将肽连接至 KLH)
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将肽抗原固定在亲和纯化抗体上• 生成 NHS 活化、胺反应性标记化合物
• 交联蛋白与羧基包被的微珠或表面
• 使用胺反应性 Sulfo-NHS 酯活化纳米微粒
• 通过 5' 磷酸基进行 DNA 标记(参见 Tech Tip #30)
产品参考文献:交联剂应用指南—检索本产品的近期参考文献