Thermo Scientific Imject EDC mcKLH 离心试剂盒包含纯化钥孔帽贝血蓝载体蛋白包,可通过肽抗原简单制备高效免疫原。该试剂盒包括即用型 KLH 载体蛋白单位、优化的反应缓冲液和可靠的脱盐离心柱,用于使用 EDC 法进行免疫原制备。
KLH 是较常用的具有免疫原性的载体蛋白,用于制备免疫接种和抗体生产所需的肽抗原。在磷酸盐缓冲液中的 KLH 制备可随时用于通过胺反应性 NHS-酯或戊二醛交联反应实现的半抗原-载体偶联。MES 缓冲液中的制剂经过优化,可用于通过羧基反应性碳二亚胺交联剂 EDC(又称 EDAC)实现肽-载体偶联。
Imject 海水养殖 KLH 和试剂盒的特点:
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便利的试剂盒—含有冻干 mcKLH(MES 缓冲液中)、EDC 交联剂和辅助组分,可轻松制备用于注射的即用型免疫原
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高得率偶联—KLH 的每个分子包含数百种伯胺,可用于通过 EDC 或 NHS 酯交联剂偶联半抗原
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质量经验证—纯化且稳定的海水养殖 KLH 在水溶液中保持溶解度,不同于载体蛋白的传统来源
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可持续来源—KLH 是从在海水养殖中生长的软体动物
大锁孔帽贝(钥孔帽贝)的选定种群中收获的,而不是从野生种群中提取
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高免疫原性—KLH 具有高分子量(4.5 x 10
5 至 1.3 x 10
7 道尔顿,350和 390 kDa 亚基聚集体),可引发比 BSA 或卵清蛋白更强的免疫应答
载体蛋白是能够在注射后刺激免疫应答的大型复杂分子。成功的生产特异针对小抗原的抗体(例如:肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价交联于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够达到足够的载体偶联,选择载体蛋白。
出于抗体生产的目的,钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH) 广泛用作与半抗原和其他抗原偶联的载体蛋白,使其更具免疫原性。由于其质量大、复杂性高,与其他载体蛋白相比,KLH 能够引发更强的免疫应答。由于该蛋白分离自软体动物,因此与哺乳动物物种在系统发育上相距较远,并且不太可能产生会与测定中的典型靶点样品发生交叉反应的抗体。
Imject 海水养殖 KLH (mcKLH) 是从海水养殖而非野生生长的帽贝中分离得到的。Imject mcKLH 具有较高的免疫原性;它在缓冲液中纯化和冻干以优化其稳定性和溶解性,可进行半抗原偶联。KLH 是一种蛋白大分子,拥有数百个伯胺和羧基基团,可以成为与 N-羟基琥珀酰亚胺酯、EDC 以及其他交联试剂偶联的靶点。
碳二亚胺交联剂
EDC 可将含羧基的半抗原(例如,肽抗原的 C 末端)偶联到高度免疫原性 KLH 载体蛋白上,用于免疫接种和抗体生产。这种免疫原制备的方法最适用于主序列中央区域含有较少或不含天门冬氨酸残基、谷氨酸残基(羧酸盐)和赖氨酸残基(伯胺)的肽抗原。由于肽含有羧酸盐和胺,EDC 偶联可使其形成各种聚合物,并在交联的载体蛋白上呈随机取向。通常情况下,这样可令载体蛋白上呈现高水平的抗原装载量,并且各个方向上均可诱导抗体产生。不过,抗原肽序列内的重要(所需的)抗原表位区域如果含有伯胺(赖氨酸残基)或羧酸盐(天冬氨酸和谷氨酸残基),该表位可能被 EDC 介导的偶联所阻断。在这种情况下,可以使用同源双官能团胺-反应性交联剂与磷酸盐缓冲液中的纯化 mcKLH,或用独特的末端半胱氨酸合成肽以及
马来酰亚胺活化 mcKLH试剂盒来制备载体蛋白偶联物。
更多产品数据•
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