Thermo Scientific 微球菌核酸酶 (MNase) 适用于从细胞裂解物中去除核酸,释放染色质结合蛋白并剪切染色质以便用于染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验。
微球菌核酸酶 (MNase) 的特点:
•酶切核酸(DNA 和 RNA)
• 高效处理双链、单链、环状和线性核酸
•在含有二价钙离子的中性至碱缓冲液条件中具有活性
•以 ≥100 单位/μL 的规格提供,溶于10 mM Tris-HCl(pH 值 7.5)、50 mM NaCl、1 mM EDTA、50% 甘油中
该微球菌核酸酶是金黄色葡萄球菌衍生酶的一种稳定液体形式。微球菌核酸酶 (MNase) 表现出针对 DNA 和 RNA 的外切和内切-5'-磷酸二酯酶活性。该酶可消化各种双链、单链、环状和线性核酸。最高活性面向单链核酸底物,并优先针对AT-或AU-富集区域。酶活性发生于 pH 值 7 至 10 条件下,且在酶切 RNA 和 DNA 底物方面完全依赖于钙。微球菌核酸酶适用于从细胞裂解物中去除核酸,释放染色质结合蛋白并剪切染色质以便用于染色质免疫沉淀 (ChIP) 实验。
微球菌核酸酶 (MNase) 的特性:• 产品为 -20°C 的液体。使用期间将酶放置在冰上。
• 微球菌核酸酶活性依赖于 Ca++。在反应缓冲液中避免钙螯合剂,如EGTA。
•在 pH 值为 7 至 10 且盐浓度小于 100 mM 时,酶具有活性。最佳酶活性发生在 37°C 下;但在室温下酶具有活性。单价金属离子(如 Na+ 和 K+)会降低活性。EGTA 或加热至 65°C 并保持 10 分钟可使酶失活。
微球菌核酸酶 (MNase) 使用的通用方案:• 在 50 mM Tris-HCl(pH 值 8.0)、5 mM CaCl
2 中稀释样品
• 如果样品仅包含核苷酸(即,无蛋白),添加 BSA 使其最终浓度为 0.1 mg/mL。
•添加微球菌核酸酶并在 37°C 下孵育反应,直至核苷酸被降解。
• 可选:通过添加 EGTA(pH 值 8.0)至最终浓度为 20 mM,停止反应。
微球菌核酸酶(产品编号 88216)的规格:• 外观:透明、无色液体,不含不可溶物质。
•单位:≥100 单位/μL
• 其它信息:1 单位定义为在 25°C 下,高度聚合 DNA 使 260 nm 处吸光度增加 0.001/min/mL 所需的酶量。
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