ActivX™ 脱硫生物素-ATP 探针

ActivX 脱硫生物素 ATP 或 ADP 探针是核苷酸衍生物，可在核苷酸结合位点的保守赖氨酸残基处共价修饰酶的活性位点。这些探针的结构由通过不稳定酰基-磷酸键连接至核苷酸的修饰生物素（脱硫生物素）组成。脱硫生物素是一种生物素类似物，与生物素结合蛋白的结合力较弱，因此生物素置换、低 pH 值或热变性都可以轻松逆转其结合。

ActivX 活性位点富集探针在确定活性酶水平方面具有优势，通过使用类似物标记的探针，可以对非活性酶和活性酶进行分析。ActivX ATP 和 ADP 探针共价标记 ATPase 的活性位点，包括分子伴侣和代谢酶，以便使用脱硫生物素标签进行选择性富集。

脱硫生物素 ATP 或 ADP 探针可用于选择性地富集、鉴定和分析靶标酶类别或评估酶抑制剂的特异性。由于即使在酶失活的情况下许多 ATPase 和其他核苷酸结合蛋白也能结合核苷酸或抑制剂，脱硫生物素探针允许在复杂样品中分析非活性和活性酶。样品与竞争活性位点的小分子抑制剂一起预孵育可用于确定抑制剂结合亲和力。活性位点核苷酸探针还可用于鉴定抑制剂脱靶。通过选择性富集，用户可以鉴定和分析样本中的靶标酶类别，或评估酶抑制剂的特异性和亲和力。

ActivX ATP 和 ADP 探针的应用：
•以剂量依赖方式对小分子结合亲和力和活性位点抑制进行分析
• 鉴定组织、细胞和亚细胞蛋白质组中的数十至数百种抑制剂靶标和脱靶
• 基于功能的酶富集

可以通过 Western 印迹或质谱分析 (MS) 来评估使用脱硫生物素探针完成的活性位点标记。对于 Western 印迹工作流程，对脱硫生物素标记蛋白进行富集，用于 SDS-PAGE 分析和后续使用特异性抗体的检测。对于 MS 工作流程，对脱硫生物素标记蛋白进行还原、烷基化处理并酶促酶切为肽。仅对脱硫生物素标记的活性位点肽进行富集，用于 LC-MS/MS 法分析。这两种工作流程均可用于确定抑制剂靶标结合，但只有 MS 工作流程才能鉴定全局抑制剂靶标和脱靶。

这些产品受限于限制性使用标记许可。