Thermo Scientific DNase I 可去除细胞裂解物中不需要的 DNA,以改善蛋白提取效率。
无 RNase DNase I 的特点:
•降解并去除样品中不需要的 DNA
•裂解单链和双链 DNA
•与 Thermo Scientific Pierce 细胞裂解试剂兼容
•减少细菌裂解物(蛋白提取物)的粘性以方便移取
脱氧核糖核酸酶 I (DNase I) 是一种单一糖基化多肽,能够降解不需要的单链和双链 DNA。该酶将 DNA 切割为 5'磷酸二核苷酸及小的寡核苷酸片段。通常将 DNase I 加入细胞裂解试剂中以去除由细菌细胞裂解物中 DNA 含量导致的粘性或去除由
体外转录产生的 RNA 中的 DNA 模板。无 RNase 的 DNase 可用于任何需要酶切 DNA 的应用,其对于避免 RNA 损伤至关重要。
关于 DNase I 使用的一般信息:
•钙离子对于 DNase I 的活性是必需的。痕量 Ca++ 可能以足够高的浓度存在,使 DNase I 具有活性,但是使用 EGTA 或无钙缓冲液可将 DNase I 的活性降低到无法检测到的水平。
•高水平(即,100 mM)的单价离子(如 Na+ 和 K+)将降低 DNase I 活性
•通过加热至 65°C 10 分钟使 DNase I 失活
•库尼兹单位:1 库尼兹单位为,在 25°C 条件(0.1M NaOAc,pH 值 5.0)下因降解高度聚合 DNA 使吸光度增加 0.001 A260nm/min/mL 所需的酶量
•降解分析单位:1 单位定义为在 37°C 条件下,在 10 mM Tris·HCl(pH 值 7.5)、50 mM MgCl
2、13 mM CaCl
2 中,10 分钟内将 1 μg 质粒 DNA 完全降解所需的酶量。
规格:
•数量:1000 单位 (1 mL)
•浓度:1 单位μ/L±20 %
• 单位定义:在 37°C 下于 10 分钟内 1 单位完全降解 1 μ g 质粒 DNA。一个 DNase I 单位相当于 0.3 库尼兹单位。
•RNase 污染:使用 RNA 转录本孵育时,不可检出核糖核酸酶活性。
•来源:
含克隆化基因编码牛 DNase I 的大肠杆菌
•分子量:约 29,000
• 配方:牛 DNase I,溶于 50 mM Tris-HCl(pH 值 7.5)、10 mM CaCl
2、50% 甘油
•配有:1 mL 10X 反应缓冲液 100 mM Tris-HCl(pH 值 7.5)、25 mM MgCl
2、1 mM CaCl
2、50 mM EDTA
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