蛋白 G 是源自 G 群链球菌的细菌细胞壁蛋白,现可在大肠杆菌中以重组形式生产。与蛋白A相同,蛋白G可与大多数哺乳动物的免疫球蛋白结合,结合部位主要为其Fc区。天然蛋白G包含两个免疫球蛋白结合位点以及白蛋白和细胞表面结合位点。重组形式的蛋白G中已除去这些白蛋白及细胞表面结合位点,以减少免疫球蛋白纯化过程中的非特异性结合。重组蛋白G分子量约为21.6kDa,但在SDS-PAGE中表观大小为31至34kDa。IgG 结合功能在 pH 值为 5 时较佳,但在近中性条件(pH 值 7.0 至 7.2)下也可高效结合。
与蛋白 A 相比,蛋白 G 可与人、小鼠和大鼠血清中更广泛的 IgG 亚类结合。其中,除了与蛋白A一样能够结合其他类型免疫球蛋白之外,蛋白G还对人IgG3、小鼠IgG1和大鼠的全部三种IgG亚型具有特别强的结合能力。因此,在涉及这些物种和抗体亚型的应用中一般建议采用蛋白G。关于其他物种,蛋白 G 对牛、山羊和绵羊 IgG 的结合能力更强,但对猪、豚鼠、犬和猫 IgG 的结合能力弱于蛋白 A。
Pierce 蛋白 G 琼脂糖使用 Thermo Scientific AminoLink 偶联化学法制备,该方法与传统配体固定方法相比具有多项优势。AminoLink 固定后,琼脂糖珠的糖单体与蛋白 A 上的天然赖氨酸残基通过简单的酰胺键结合。与典型的溴化氰 (CNBr) 固定法不同,AminoLink 方法不引入任何新的化学基团,从而避免了可能导致的非特异性结合,并且形成基本不可逆的稳定结合。所得的高结合容量树脂可保留固定化蛋白的结合功能
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.