GeneArt® IIs 型组装试剂盒 Aar I 通过在单次反应中同时切割和连接，提供多达 8 个 DNA 片段的无缝克隆和组装。该试剂盒使用类似于 Golden Gate 克隆的技术和 IIs 型限制性内切酶 Aar I，可用于以预先确定的顺序将多个片段组装到任何兼容载体中。由于 IIs 型组装不是基于同源重组，重排风险极低，并且需要对最终构建体进行最低限度的序列确认。

试剂盒有三种规格，每种规格都有不同的 IIs 型限制性内切酶（Aar I、Bsa I 或 Bbs I）。所有规格均包括全合一酶混合物、克隆载体和克隆对照品。应使用我们的 GeneArt® 引物和构建体设计工具确定适合您的片段的 GeneArt® 组装试剂盒；它可提供一个易于使用的界面，以便设计您的构建体，创建引物并对其进行排序。

•以任何顺序将多个 DNA 片段组装到任意兼容载体中而不出现痕迹
•在克隆同源或重复序列时，避免同源重组和相关重排
•用于组装 TAL、基因变体和重复序列
•利用定制载体元件创建您自己的克隆和表达载体
•尽可能减少最终构建体的序列确认
•从三种 IIs 型酶中挑选

IIs 型克隆
GeneArt® IIs 型克隆是一种简单的两步流程，包括体外组装反应以及随后转化至感受态大肠杆菌的过程。IIS 型限制性核酸内切酶 Aar I 可识别不对称 DNA 序列，并在与 Aar I 识别位点的规定距离处切割 DNA 分子。DNA 片段的末端可设计为位于 Aar I 限制位点的侧面，以便片段酶切可去除识别位点并产生可无缝连接的互补突出端，形成一个缺乏原始位点的接合点。该试剂盒包括一个目标载体（称为 pType IIs），针对该方法进行了优化。

高效、灵活和精确的克隆
使用 GeneArt® IIs 型组装试剂盒，影响克隆效率的主要因素是 DNA 元件大小、总最终分子大小 (? 10 kb) 以及片段的质量和特异性。

克隆至 pType IIs 的不同片段数量的典型克隆效率为：

•对于 5 个片段（各 1 kb），> 95%
•对于 8 个片段（各 1 kb），> 60%
•对于 2 个相同片段（各 1 kb），> 85%

电脑模拟克隆设计支持
GeneArt® IIs 型克隆中的一个关键步骤是具有适当识别位点和间距的片段和寡核苷酸的正确设计，以帮助确保克隆成功组装。为简化和加速设计流程，我们提供了 GeneArt® 引物和构建体设计工具来帮助您通过电脑模拟设计实验。该工具为组装推荐正确的 GeneArt® 试剂盒，检查实验设计与产品规格的兼容性，设计 DNA 寡核苷酸（如果需要），并向用户提供载体的图形表示以及与 VectorNTI® 软件兼容的 GenBank 格式的可下载注释序列。

其他推荐产品：

•Zero Blunt® TOPO® PCR 克隆试剂盒，不含感受态细胞（货号 450245）
• Zero Blunt® TOPO® PCR 克隆试剂盒，含 One Shot® TOP10 化学感受态大肠杆菌（货号 K280020）
• One Shot® MAX Efficiency™ DH10B™ T1 噬菌体抗性细胞（货号 12331-013）