TURBO™ DNase (2 U/μL)

TURBO™ DNase 非特异性地切割双链 DNA，使 5' 磷酸化寡脱氧核苷酸离开双链。它增强了 DNA 结合的亲和力，在盐存在的情况下保持活性。

注：该产品仅为酶。如果您想使用这种酶＋试剂产品使酶失活，并在酶切后去除样品中的二价阳离子，请参见 TURBO DNA-free™ 试剂盒。

TURBO™ DNase 的特点包括：

• 活性提高多达 50 倍，催化效率提高多达 350%
• 在含有高达 0.25 M 盐的溶液中高效降解 DNA
• 将 DNA 高效地酶切为寡核苷酸
• 在清除体外转录反应中的 DNA 模板方面有很大的优势
• 无 RNase，重组菌来源

使用 TURBO™ DNase
DNase I 通常用于在 RT-PCR 前清除 RNA 样品中的 DNA 污染。常规 DNase I 对 DNA 亲和力较弱，对低浓度 DNA 进行切割时效率很低。此外，DNase I 对盐很敏感；低至 20 mM 的 NaCl 可使酶活性降低 30%。最后，DNase I 是从牛胰腺中纯化而来，牛胰腺是 RNase A 最丰富的天然来源之一。在 DNase I 制备过程中，存在 RNase 活性受污染的风险，因此要求必须将酶彻底纯化。尽管存在这些限制，如今研究人员所使用的 DNase I 与半个多世纪前 Kunitz 首次表征的酶相同。

一种特性优于野生型 DNase I 的 DNase
TURBO™ DNase 是使用蛋白质工程方法研制而成的，该方法将氨基酸变化引入野生型 DNase I 的 DNA 结合口袋中。这些变化显著增强了蛋白质对 DNA 的亲和力。结果得到一种通用酶，该酶对 DNA 的 K_m 降低 6 倍，并且在接近 200 mM 一价盐的溶液中，甚至在 DNA 浓度为纳摩尔级 (nM) 范围内，能够保持至少 50% 的峰值活性。在采用 DNase I 或 TURBO™ DNase 处理体外转录反应时，TURBO™ DNase 去除的起始质粒 DNA 模板量是野生型酶的 63 倍。TURBO™ Dnase 结合超低浓度 DNA 的高效程度意味着该酶在去除痕量 DNA 污染时特别有效。因为随着 DNase 反应的进行，可清理的 DNA 底物的量会减少，所以对于从样品中彻底去除 DNA 而言，这就变得更加重要。TURBO™ DNase 与 DNA 亲和力强，所以在与野生型 DNase 的对比中，其有功能上的优势。这在 RT-PCR 中有较好的应用价值，在 RT-PCR 过程中，即使少量 DNA 拷贝也会导致 PCR 产生假阳性结果。