用于进行显微镜检查和 HCS 的 Click-iT™ TUNEL Alexa Fluor 成像检测试剂盒

使用 Click-iT TUNEL Alexa Fluor 488、594 和 647 成像检测试剂，只需两小时即可轻松有效地筛选出凋亡细胞。这些 TUNEL 检测试剂盒预期用于进行显微镜检查和高内涵筛选 (HCS)，使用铜催化反应以检测 DNA 片段末端 DNA 末端掺入的炔烃修饰后的 dUTP。与使用其他修饰核苷酸的检测试剂相比，这些细胞凋亡检测试剂盒的检测速度较快（两小时内完成），并且能够在同等条件下检测到更高百分比的凋亡细胞。Click-iT TUNEL 检测试剂还可用于与表面和细胞内生物标记物检测方法（包括测量 GFP 或 RFP 发出的荧光信号的方法）一起进行多通路检测。

细胞凋亡的特征是出现已界定的细胞过程，包括细胞变圆、出泡和 DNA 片段化。TUNEL 检测是使用最广泛的分析方法，用于检测组织样品中的凋亡细胞 DNA 片段，首先在 DNA 片段的 3’-OH 末端掺入修饰后的 dUTP。dUTP 通常会包括荧光基团分子。由于荧光基团大小不一，修饰后的 dUTP 的掺入率低于预期结合率，对 TUNEL 检测的灵敏度产生负面影响。目前可用的 TUNEL 检测试剂盒中使用的荧光基团通常会出现光漂白和荧光光谱重叠问题，这两种问题都会降低这些检测的灵敏度和多通路检测能力。

Click-iT Plus TUNEL 检测专为解决这些问题而开发，并以叠氮化物与炔烃之间的铜 (I) 催化（即点击）反应为基础。与尺寸较大的 (MW ˜100,000 Da) 抗体相比，Alexa Fluor 叠氮化物的尺寸较小（分子量约为 1 kDa），使得 Alexa Fluor 488、594 或 647 染料更容易掺入复杂样品中。这可进行轻度固定或透化，并可缩短检测周转时间（约两小时），并且能够在同等条件下检测到更高百分比的凋亡细胞。由于 Click-iT Plus TUNEL 检测试剂的反应条件较为温和，该试验也可与荧光蛋白或染料一起进行多通路检测。

Click-iT TUNEL Alexa Fluor 成像检测试剂包含用于准确可靠地检测生长在盖玻片或 96 孔微孔板上的贴壁细胞中的细胞凋亡情况所需的所有组分，还包括 DNase I，以使阳性对照品实现链断裂。