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Click-iT™ EdU Alexa Fluor™ 488 流式细胞术分析试剂盒
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Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 488 流式细胞分析检测试剂盒用于分析增殖细胞中的 DNA 复制,是一种较传统 BrdU 法更简单、更可靠的检测方法。采用流式细胞仪的 488 nm 激光分析新合成的 DNA。Click-iT™ Plus 配方与标准荧光基团(包括 R-PE、R-PE 串联体以及荧光蛋白)兼容。
可联用 与初代 Click-iT™ EdU 流式细胞分析检测相比,Click-iT Plus™ 配方具有更好的联用性。Click-iT™ Plus EdU 检测可与 R-PE 和 R-PE 串联体,以及各种荧光蛋白(如 GFP 和 mCherry)配合使用,同时还具有初代 Click-iT™ EdU 检测准确、快速的特点。
更出色的 BrdU 替代方法,提供更优结果 更准确的增殖分析方法,可直接测量 DNA 合成。最初,这是通过掺入放射性核甘酸来完成的。随后基于抗体的溴脱氧尿苷(BrdU,核苷类似物)法取代了这种检测方法。Click-iT™ Plus EdU 流式细胞分析检测是替代 BrdU 检测的新方法。EdU(5-乙炔基-2´-脱氧尿苷)是胸苷类似物,可在活跃的 DNA 合成过程中掺入 DNA 中。检测基于点击化学,在铜催化反应中,炔与染料标记的叠氮化物反应,形成稳定的共价键。在该应用中,在 EdU 的乙炔基团中发现了炔烃,而叠氮化物偶联至 Alexa Fluor™ 染料。标准流式细胞分析方法用于检测细胞群中 S 期细胞的百分比。
温和条件,可与细胞周期染料和抗体配合使用 小型叠氮染料,可使用温和条件高效检测掺入的 EdU,同时具有足够的基于醛的标准固定和去污剂透化能力,可用于 Click-iT™ Plus 检测试剂,以获得 DNA。这与 BrdU 检测相反,BrdU 检测需要使用 HCl、加热或用 Dnase 消化变性 DNA,使 BrdU 暴露以便用抗 BrdU 抗体检测。BrdU 法处理样品会改变细胞周期分布,且 HCl 可破坏抗原识别位点。相比之下,易于使用的 Click-iT™ Plus EdU 检测与细胞周期染料兼容。Click-iT™ Plus EdU 检测也可与细胞表面和细胞内标记物的抗体以及标记标准荧光基团的偶联物(包括 R-PE、R-PE 串联体和荧光蛋白(GFP 和 mCherry)联用。
快速简便的方案 Click-iT™ Plus EdU 方案基于免疫组化抗体标记的醛基固定和洗涤剂透化步骤。但是,EdU 与其他固定剂/透化剂(包括皂苷和甲醇)兼容。只需五步就能分析细胞增殖数据:
1.’用 EdU 处理细胞。 2.固定并透化细胞。 3.使用 Click-iT™ Plus 检测混合物检测 S 期细胞 30 min。 4.清洗一次。 5.分析。