Click-iT™ Plus EdU Alexa Fluor™ 350 流式细胞术试剂盒

Click-iT Plus EdU Alexa Fluor 350 流式细胞术试剂盒用于分析增殖细胞中的 DNA 复制，是一种较传统 BrdU 法更简单、更可靠的检测方法。采用流式细胞仪的紫外激光分析新合成的 DNA。Click-iT Plus 配方与标准荧光基团（包括 R-PE、R-PE 串联体以及荧光蛋白）兼容。

•多色检测—与 R-PE（和串联体）和荧光蛋白兼容，
• 准确—优于 BrdU 检测结果
• 快速—检测时间低至 60 分钟

查看流式细胞仪 Click-iT EdU 和 Click-iT Plus EdU 检测试剂盒选择指南。

多色检测
Click-iT Plus Alexa Fluor 350 EdU 检测可与 R-PE 和 R-PE 串联体以及荧光蛋白（如 GFP 和 mCherry）联合使用。Alexa Fluor 350 标记试剂在 350 nm UV 激光下很容易激发，发射波长为 438 nm。

更出色的 BrdU 替代方法
增殖分析更准确的方法是直接测量 DNA 合成。最初，这是通过掺入放射性核甘酸来完成的。随后基于抗体的溴脱氧尿苷（BrdU，核苷类似物）法取代了这种检测方法。Click-iT Plus EdU 流式细胞术是替代 BrdU 检测的新方法。EdU（5-乙炔基-2´-脱氧尿苷）是脱氧胸腺嘧啶的核苷类似物，可在活跃的 DNA 合成过程中掺入 DNA 中。检测基于点击化学，在铜催化反应中，炔与染料标记的叠氮化物反应，形成稳定的共价键。在该应用中，EdU 的乙炔基团提供乐炔，Alexa Fluor 染料提供了叠氮化物。标准流式细胞术用于检测细胞群中 S 期细胞的比例。

温和条件下使用细胞周期染料和抗体
在温和条件下，小分子叠氮染料高效地与掺入的 EdU 反应，然后采用标准醛基固定，洗涤剂透化，从而使 Click-iT Plus 检测试剂检测出 DNA。这与 BrdU 检测相反，BrdU 检测需要使用 HCl、加热或用 Dnase 消化变性 DNA，使 BrdU 暴露以便用抗 BrdU 抗体检测。BrdU 法处理样品会改变细胞周期分布，且 HCl 可破坏抗原识别位点。相反，易于使用的 Click-iT Plus EdU 检测试剂盒与细胞周期染料兼容。Click-iT Plus EdU 检测也可与细胞表面和细胞内标记物的抗体以及标记标准荧光基团的偶联物（包括 R-PE、R-PE 串联体和荧光蛋白（GFP 和 mCherry）联用。

快速简便
Click-iT Plus EdU 方案基于免疫组化抗体标记的醛基固定和洗涤剂透化步骤。但是，EdU 与其他固定剂/透化剂（包括皂苷和甲醇）兼容。只需五步就能分析细胞增殖数据：

1.用 EdU 处理细胞。
2.固定并透化细胞。
3.用 Click-iT Plus 检测混合液孵育 S 期细胞 30 分钟。
4.冲洗一次。
5.分析。

在某些情况下，60 分钟内即可获得结果，但我们建议 90 分钟。