Thermo Scientific Exonuclease III (ExoIII) 表现出四种催化活性。ExoIII 的 3'→5' 脱氧核糖核酸外切酶活性对双链 DNA 具有特异性。ExoIII 从平末端、5'-突出端或缺口处降解 dsDNA,从 DNA 链的 3'-端释放 5'-单核苷酸,产生单链 DNA 片段。其在 DNA 3'-突出端(至少四个碱基长,且不带有 3'-末端 C-残基)、单链 DNA 或硫代磷酸酯连接的核苷酸上不具活性。
ExoIII 3'-磷酸酶活性去除 3'-末端磷酸基团,生成一个 3'-OH 基团。ExoIII RNase H 活性可以核酸外切方式降解 RNA-DNA 杂交体中的 RNA 链。ExoIII 无嘌呤/无嘧啶-核酸内切酶活性在无嘌呤或无嘧啶位点切割磷酸二酯键,产生 5'-末端(无碱基脱氧核糖 5'-磷酸残基)。
产品优势• 在限制性内切酶缓冲液中具有活性
应用• 与
S1 核酸酶协同,在 DNA 片段中创造单向缺失• 生成用于 DNA 双脱氧测序的单链模板
•定点突变
• PCR 产物克隆
• 链特异性探针制备
备注ExoIII 的 DNA 酶切速度取决于温度、盐浓度和 DNA 对反应混合物中酶的摩尔比。每次实验的优化反应条件都需重新测试。