Thermo Scientific 快速 DNA 末端修复试剂盒可在 5 分钟内完成 DNA 末端的平末端化和磷酸化,以供后续在平末端连接中使用。
试剂盒中的所有组分都包含预混试剂,从而减少移液步骤并提供便利。末端修复酶混合物含有经过优化的 T4 DNA 聚合酶和 Klenow 片段混合物,可实现对片段化 DNA 进行高效平末端化,并含有 T4 多聚核苷酸激酶 (PNK) 从而对 DNA 末端进行高效磷酸化。10X 末端修复反应混合物包含优化的反应缓冲液、ATP 和 dNTP。
片段化基因组 DNA(限制性内切酶酶切、雾化或超声处理)、限制性内切酶酶切质粒 DNA、双链 cDNA 等样品和包含 dA 突出端的 PCR 产物均与此试剂盒兼容。
特点在 DNA 末端修复反应中,片段化 DNA 被转化为含有 5'-磷酸基和 3'-羟基的平末端 DNA。末端修复酶混合物的 5'→3' 聚合酶活性填充 5' 突出 DNA 末端,而 3'→→5' 核酸外切酶活性去除 3'-突出端。T4 PNK 向非磷酸化 DNA 片段(如 PCR 产物)末端添加 5'-磷酸盐。(
参见下面的表 1 和图 1)。
产品优势•
高效 - 0.5 至 5 μg DNA 的平末端化和磷酸化
•
快速—反应可在 5 分钟内完成
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便利—反应组分预先混合从而减少移液步骤
应用• 双链 DNA(雾化 DNA、超声处理 DNA、限制性内切酶酶切 DNA、cDNA、PCR 产物)的平末端化和磷酸化
包括• 末端修复酶混合物
• 10X 末端修复反应混合物
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