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Invitrogen™
测序用 GeneRacer™ 试剂盒（含 AMV RT）和 TOPO TA Cloning™ 试剂盒
GeneRacer™ 是一种先进的 RACE（cDNA 末端快速扩增）技术，可提高全长 5´ 和 3´ cDNA 了解更多信息
货号 L150001
价格（CNY)/ 1 kit*
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GeneRacer™ 是一种先进的 RACE（cDNA 末端快速扩增）技术，可提高全长 5´ 和 3´ cDNA 末端的扩增效率。使用 GeneRacer™ 试剂盒，您可以：
•由长度达 10 kb 的转录本生成 cDNA
• 获得稀有转录本（少于 30 拷贝/细胞）的全长 5´ 末端
• 克隆全长 5´ 和 3´ 末端以构建完整 cDNA 序列
GeneRacer™ 试剂盒包含 SuperScript™ III 逆转录酶 (RT)，用于改进来自长且复杂 mRNA 的全长 5´ 末端扩增。SuperScript™ III RT 的 RNase H 部分已发生突变，可避免在 cDNA 合成期间切割 mRNA。这样可增加 cDNA 的大小和得率。SuperScript™ III RT 比野生型 RT 更耐热。可以在较高温度下进行逆转录，解开复杂模板的二级结构，并能够完成 cDNA 合成。
GeneRacer™ 工作原理
GeneRacer™ 试剂盒可确保仅扩增包含全长 cDNA 末端的转录本 (1,2)。图 1 概述了 GeneRacer™ 试剂盒的工作原理。高级方案从 RNA 水平开始，仅专门靶向 5´ 加帽 mRNA。在后续步骤中，移除帽并用 GeneRacer™ RNA 寡核苷酸替换。在逆转录过程中，GeneRacer™ RNA 寡核苷酸序列被整合到 cDNA 中。只有完全逆转录的 cDNA 将包含该已知序列。然后使用 GeneRacer™ RNA 寡核苷酸序列特异性 GeneRacer™ 5´ 引物和基因特异性引物进行 5´ RACE PCR。得到含有全长 5´ cDNA 序列的扩增 DNA。
灵敏度和长度
为证明 GeneRacer™ 试剂盒捕获全长 5fi cDNA 末端的能力，扩增了转录起始位点已知的基因的 5fi 末端。从总 RNA 开始，按照 GeneRacer™ 方案，扩增长转录本 (10 kb) 和稀有信息（0.01% 或 30 个拷贝/细胞）（图 2）。
•由长度达 10 kb 的转录本生成 cDNA
• 获得稀有转录本（少于 30 拷贝/细胞）的全长 5´ 末端
• 克隆全长 5´ 和 3´ 末端以构建完整 cDNA 序列
GeneRacer™ 试剂盒包含 SuperScript™ III 逆转录酶 (RT)，用于改进来自长且复杂 mRNA 的全长 5´ 末端扩增。SuperScript™ III RT 的 RNase H 部分已发生突变，可避免在 cDNA 合成期间切割 mRNA。这样可增加 cDNA 的大小和得率。SuperScript™ III RT 比野生型 RT 更耐热。可以在较高温度下进行逆转录，解开复杂模板的二级结构，并能够完成 cDNA 合成。
GeneRacer™ 工作原理
GeneRacer™ 试剂盒可确保仅扩增包含全长 cDNA 末端的转录本 (1,2)。图 1 概述了 GeneRacer™ 试剂盒的工作原理。高级方案从 RNA 水平开始，仅专门靶向 5´ 加帽 mRNA。在后续步骤中，移除帽并用 GeneRacer™ RNA 寡核苷酸替换。在逆转录过程中，GeneRacer™ RNA 寡核苷酸序列被整合到 cDNA 中。只有完全逆转录的 cDNA 将包含该已知序列。然后使用 GeneRacer™ RNA 寡核苷酸序列特异性 GeneRacer™ 5´ 引物和基因特异性引物进行 5´ RACE PCR。得到含有全长 5´ cDNA 序列的扩增 DNA。
灵敏度和长度
为证明 GeneRacer™ 试剂盒捕获全长 5fi cDNA 末端的能力，扩增了转录起始位点已知的基因的 5fi 末端。从总 RNA 开始，按照 GeneRacer™ 方案，扩增长转录本 (10 kb) 和稀有信息（0.01% 或 30 个拷贝/细胞）（图 2）。
仅供研究使用。不可用于诊断程序。
规格
细菌或酵母菌株TOP10
克隆方法TOPO TA
产品规格试剂盒
适用于（应用）反转录
包括每个 GeneRacer 试剂盒均包含 GeneRacer 盒、RT 盒、S.N.A.P. 柱和 TOPO Cloning 试剂盒。GeneRacer 和 RT 盒含有足够的试剂（可用于 5 次 cDNA 反应外加 1 次对照反应）和引物（可用于 50 次 PCR 反应）。GeneRacer 盒中包括酶 CIP、TAP、T4 RNA 连接酶及其缓冲液、GeneRacer RNA 寡核苷酸（预等分和冻干）、GeneRacer 引物和巢式引物、RNaseOUT 重组核糖核酸酶抑制剂、苯酚/氯仿、贻贝糖原、无菌水和对照品。在 -20°C 下储存。SuperScript III RT 盒包括 SuperScript III RT、5X 第一链缓冲液、DTT、RNase H、随机引物、GeneRacer Oligo dT 引物和 dNTP 混合物。在 -20°C 下储存。克隆 AMV RT 盒包括克隆 AMV RT、5X RT 缓冲液、随机引物、GeneRacer Oligo dT 引物和 dNTP 混合物。
产品线GeneRacer™、TA Cloning™、TOPO™
产品类型克隆试剂盒
数量1 个试剂盒
载体pCR4-TOPO TA
Unit Size1 kit*
内容与储存
每个 GeneRacer™ 试剂盒均包含 GeneRacer™ 盒、RT 盒、S.N.A.P.™ 柱和 TOPO™ Cloning 试剂盒。GeneRacer™ 和 RT 盒含有足够的试剂（可用于 5 次 cDNA 反应外加 1 次对照反应）和引物（可用于 50 次 PCR 反应）。GeneRacer™ 盒中包括酶 CIP、TAP、T4 RNA 连接酶及其缓冲液、GeneRacer™ RNA 寡核苷酸（预等分和冻干）、GeneRacer™ 引物和巢式引物、RNaseOUT™ 重组核糖核酸酶抑制剂、苯酚/氯仿、贻贝糖原、无菌水和对照品。在 -20°C 下储存。SuperScript™ III RT 盒包括 SuperScript™ III RT、5X 第一链缓冲液、DTT、RNase H、随机引物、GeneRacer™ Oligo dT 引物和 dNTP 混合物。在 -20°C 下储存。克隆 AMV RT 盒包括克隆 AMV RT、5X RT 缓冲液、随机引物、GeneRacer™ Oligo dT 引物和 dNTP 混合物。在 -80°C 下储存。一个单独的袋包含 10 个 S.N.A.P.™ 凝胶纯化柱，用于凝胶纯化 PCR 产物。在室温下储存。测序用 10 次反应 TOPO™ Cloning 试剂盒包含两盒。TOPO™ Cloning 盒储存在 -20°C 下。感受态大肠杆菌盒储存在 -70°C 下。妥善储存时，所有试剂均可保证 6 个月的稳定。