pHrodo™ Red 和 Green 表皮生长因子 (EGF) 和 pHrodo™ Red 转铁蛋白偶联物
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pHrodo™ Red 和 Green 表皮生长因子 (EGF) 和 pHrodo™ Red 转铁蛋白偶联物
利用 pHrodo Red 和 pHrodo Green 表皮生长因子 (EGF) 和 pHrodo Red 转铁蛋白偶联物,可在 HCS、流式细胞分析、基于微孔板的荧光测定和 HTS 等多种应用中用于检测细胞中的内化 EGF 和转铁蛋白。
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利用具有高活性的 pHrodo Red 和 pHrodo Green 表皮生长因子 (EGF) 偶联物和 pHrodo Red 转铁蛋白偶联物检测内化的 EGF 或转铁蛋白。这些偶联物包括与高活性 EGF 或转铁蛋白分子直接关联的 pHrodo 染料,可在 HCS、流式细胞分析、微孔板荧光测定和 HTS 等多种应用中用于检测内化的 EGF 和转铁蛋白分子。pHrodo Red 和 pHrodo Green 染料在暴露于酸性环境(如内体和溶酶体中)时呈强荧光。
pHrodo Red 和 pHrodo Green 表皮生长因子 (EGF) 偶联物由 pHrodo Red 或 pHrodo Green 染料组成,可直接偶联高活性的人类重组 EGF 分子并用于检测细胞中的内化 EGF 受体。荧光标记的 EGF 使科学家能够考察受体-膜之间的相互作用,研究受体分布,计算 EGF 与受体相互作用的速率常数等。随 pH 值变化而变化的荧光标记进一步提高了检测水平。
pHrodo Red 转铁蛋白偶联物由 pHrodo Red 染料组成,可直接偶联高活性转铁蛋白分子,用于检测细胞中的内化转铁蛋白。转铁蛋白是一种单体血清糖蛋白(∼80,000 道尔顿),可结合脊椎动物细胞表面的特异性受体,并通过受体介导的内吞作用,递送多达两个 Fe3+ 原子。携带铁的转铁蛋白进入核内体后,酸性环境即可促使铁离子从转铁蛋白–受体复合物中解离。铁释放后,脱铁转铁蛋白被回收至细胞膜中,其从受体中释放出来以结合更多的铁。
高度光稳定的 pHrodo Red 和 pHrodo Green 染料在中性 pH 条件下呈弱荧光,但是当通过 EGF 或转铁蛋白特异性内化时,在酸性内体中呈强荧光。因此,其可测定内化的 EGF 或转铁蛋白以及动态监测活细胞中的 EGF 或转铁蛋白内化过程。
pHrodo Red EGF 偶联物和 pHrodo Red 转铁蛋白偶联物的激发/发射波长为 560/585 nm,可与多种蓝色、红色和远红色染料报告基因(如 Mitosox Red、CellEvent Caspase 3/7 Red、NucBlue、RFP 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。pHrodo Green EGF 偶联物的激发/发射波长为 509/533 nm,可与多种蓝色、红色和远红色染料报告基因(如 Mitosox Red、CellEvent Caspase 3/7 Red、NucBlue、RFP 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。
pHrodo Red 与 pHrodo Green EGF 偶联物和 pHrodo Red 转铁蛋白偶联物与多种应用兼容,包括传统荧光显微术、高内涵筛选 (HCS)、流式细胞分析和基于微孔板的荧光测定或高通量筛选 (HTS) 等。这些偶联物还与各种宽视野或共聚焦荧光显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪和高内涵分析仪兼容。