ProLong™ 玻璃抗淬灭封片剂

ProLong 玻璃抗淬灭封片剂是一种基于甘油、硬质、即用型封片剂，可直接用于在显微镜载玻片或盖玻片上荧光标记细胞或组织样品。该试剂不含 DNA 染色剂或蓝色 DNA 染色剂 NucBlue (Hoechst 33342) 或深红色 DNA 染色剂 SYTOX Deep Red。ProLong 玻璃封片剂在固化后折射率为 1.52，类似于玻璃盖玻片，与浸镜油和油浸镜光学显微镜兼容，可实现卓越的分辨率和灵敏度。ProLong 玻璃封片剂也设计用于在可见和近红外光谱内提供无与伦比的光漂白保护。对于图像深度范围为 0 至 100 µm 的明亮高分辨率 Z-Stack、3D 和 2D 图像，您可以将 ProLong Glass 抗淬灭封片剂与几乎任何荧光染料或荧光蛋白（如 GFP、RFP、mCherry）以及任何细胞/组织类型配合使用。对于折射率为 1.52 的非固化封片剂，请尝试 SlowFade 玻璃软质抗淬灭封片剂。

ProLong Glass 抗淬灭封片剂具有高折射率 1.52 和卓越抗淬灭配方，具有以下优势：
•轴向分辨率提高达 75% 以获得清晰图像
• 可成像焦点深度是折射率为1.47封片剂的 3–4 倍，单细胞层、组织切片或 3D 细胞培养物高达 150 μm 厚度/焦点深度均具有清晰图像
• 在光谱范围内呈现低背景
• 保护信号不被受抑制的光漂白影响
• 玻片封固样品可维持数周至数月的稳定性
• 易于使用
• 可以选择含或不含 DAPI

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ProLong 玻璃硬质抗淬灭封片剂已经混合，为即用型，装在含或不含 DNA 染色剂的滴瓶或 10 mL 瓶中。NucBlue (Hoechst 33342) 与 DNA 结合时由紫外光激发，激发波长为 360 nm，上限发射波长为 460 nm，使用 DAPI 传统滤光片检测。SYTOX 深红染色剂与 DNA 结合时由红光激发，激发波长为 660 nm，上限发射波长为 682 nm，使用 Cy5/深红传统滤光片检测。除去过量的水后，只需将一滴封片剂加在样品上、加上盖玻片、固化和成像。ProLong 玻璃封片剂是一种硬质固化封片剂，可较大限度降低光学通路中的光学折射和球面像差，从而能够更长期地储存样品，并有助于保护您的样品免受光漂白。在固化过程中，ProLong Glass 封片剂不会变色或收缩，因此在封固玻片后数周甚至数月仍可获取高质量的荧光图像。

ProLong Glass 抗淬灭封片剂（含 NucBlue 染色剂）含有经过优化的 Hoechst 33342 染色剂浓度，可为大多数细胞和组织提供卓越细胞核标记。对于厚度超过 30 µm 的样本，不建议使用含 NucBlue 染色剂的 ProLong 玻璃封片剂。较厚的样本需要使用标记试剂进行更长时间的孵育，因此建议使用 NucBlue Live ReadyProbes 试剂进行预孵育。

较明亮和较清晰的图像
研究表明通过匹配封固介质的折射率，可改善显微镜检查系统的轴向分辨率，从而较大限度提高物镜的光收集 (1–3)。Fouquet 等人发现在使用具有高折射率介质的共聚焦显微镜时，轴向分辨率显著提高 (3)。当折射率为1.52的 ProLong 玻璃抗淬灭封片剂与折射率为1.47的封片剂进行比较时，在 40 µm 和 100 µm 焦点深度下，轴向分辨率分别提高了 32% 和 75%（见下图）。随着样品内焦点深度的增加，荧光基团的信号强度和灵敏度也得到了改善。横向分辨率和灵敏度也得到了同等或更大的改善。这使得 ProLong 玻璃抗淬灭封片剂成为适用于采集细胞和组织的 Z 轴层扫、3D 和 2D 图像（0至 100 µm 深度）的优越封固剂（见下图）。

抑制可见光和近红外光谱的光漂白
无论您使用的是哪种荧光染料或荧光蛋白，ProLong 玻璃抗淬灭封片剂都有助于提供卓越的光漂白保护。经证实其在一系列荧光染料（包括 Alexa Fluor、FITC、TRTC、Texas Red、Cy3 和 Cy5 染料）中具有较佳的性能（见下图）。ProLong 玻璃封片剂不会淬灭荧光基团，可以使荧光染料在无背景信号的情况下发出更明亮的信号，有助于您获得极高质量、高分辨率的图像，可供发表使用。

成像期间和长期储存期间信号稳定
ProLong 玻璃抗淬灭封片剂是存档含荧光染料或荧光蛋白样品以及在长时间成像过程中保持信号强度的理想选择，例如在共聚焦激光扫描照明下重复扫描，或使用超分辨率显微镜成像时。易于使用—只需从染色样品中去除多余的水，然后固化。

具有匹配清晰图像的最佳折射率
对于现代高分辨率成像应用，折射率匹配至关重要。ProLong 玻璃抗淬灭封片剂可固化至1.52的折射率。此外，这种固化特性无需使用可能会损坏或毁坏现代显微镜物镜的脏污丙烯酸树脂（如，指甲油）。

参考文献
1：Cremer C, Masters BR.显微镜分辨率增强技术。Eur Phys J. 2013 38(3):281-344.
2：Shimi T, Kittisopikul M, Tran J, Goldman AE, Adam SA, Zheng Y, Jaqaman K, Goldman RD.通过超分辨率显微镜显示核纤层 A、C、B1 和 B2 的结构组织。Mol Biol Cell.2015 26(22):4075-86.
3：Fouquet C, Gilles JF, Heck N, Dos Santos M, Schwartzmann R, Cannaya V, Morel MP, Davidson RS, Trembleau A, Bolte S. 使用新的高折射率封片剂提高共聚焦显微镜的轴向分辨率。PLoS One.2015 10(3):e0121096.