SAIVI Alexa Fluor 647 抗体/蛋白标记试剂盒提供了使用胺反应性远红外荧光
Alexa Fluor 647 染料(激发/发射波长 650/665 nm)便利标记抗体或蛋白以进行
体内动物成像应用所需的材料。该试剂盒进行了优化,以便在每次反应中使用 Alexa Fluor 647 标记 1 mg IgG 抗体;也可以标记相似量的其他蛋白 (> 20 kDa)。每个试剂盒含有执行 3 次标记反应、标记度 (DOL) 修饰和后续纯化以去除游离染料所需的全部组分。这款蛋白标记试剂盒包括易于使用的预填充离心柱,可实现快速染料去除和高抗体回收,通常大于 85%。标记前必须去除样品中的稳定蛋白。
SAIVI Alexa Fluor 647 抗体/蛋白标记试剂盒的特点包括:
• 便利 — 标记蛋白通常可在 90 min 内立即可用(手动操作时间 ∼15 min)
• 高偶联物回收率 — 预填充离心柱通常会使抗体偶联物的回收率达到 > 85%
• 简单的方案 — 反应、分离、使用;包括 DOL 测定和修饰的详细说明
• 快速纯化 — 使用随附的预填充离心柱可在 15 分钟内快速去除未结合染料
为控制抗体偶联物的 DOL,SAIVI Alexa Fluor 647 抗体/蛋白标记试剂盒包括一种 DOL 调节试剂和通过将特定量的该试剂添加到标记反应中来从其固有上限值降低 DOL 的说明。通过该方法,可快速且可重现地获得具有不同染料与蛋白比值的抗体制备物,无需显著改变标记或纯化条件。 DOL 易于改变,从而可更有效地优化以用于体内成像应用,其中蛋白的 DOL 可对信背比、生物分布和清除率产生显著影响。
使用标记一抗获得更好的结果和工作流程使用荧光基团直接标记的一抗所产生的背景荧光通常更低且非特异性结合程度更低。此外,如果直接使用兼容的荧光基团进行标记,同种型或来源于同一物种的多种一抗可轻松用于同一实验。
Alexa Fluor 染料的优点与传统染料相比,Alexa Fluor 染料更明亮、光稳定性更好,且在 pH 值 4 至 10 之间的 pH 值耐受性更强。通常,在使用 Alexa Fluor 染料时,无需分子内淬灭即可实现更高水平的标记。
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