SuperScript™ IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒

Invitrogen SuperScript IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒可从完整的单细胞（1–1,000个）或少量总 RNA（2 pg–10 ng）直接高效合成并扩增 cDNA。其采用方便操作的预混规格，含有细胞裂解、反转录 (RT) 和 PCR 扩增所需的所有组分。优质的酶（SuperScript IV 反转录酶和 Platinum SuperFi U DNA 聚合酶）组合确保高得率、灵敏度和准确度。由于反应时间短且实操时间极短，只需两小时即可完成这种简单的单管预扩增方案。制得的高质量完整 cDNA 可用于新一代测序 (NGS) 应用或实时荧光定量 PCR 基因表达分析。

SuperScript IV 单细胞/低上样量 cDNA 预扩增试剂盒的特点包括：
• 极佳灵敏度 — 可从低至单个细胞或 2 pg 的总 RNA 中轻松检测低丰度靶标
• 高质量 cDNA — 均匀覆盖，可获得全长转录信息
• 简化的工作流程 — 简单的单管实验方案
• 节省时间 — 裂解和反转录时间短
• 通用 — 完整预扩增兼容 NGS 或实时荧光定量 PCR 分析的下游分析

试剂盒利用了 SuperScript IV 反转录酶的末端脱氧核苷转移酶 (TdT) 活性。捕获含 oligo(dT) 和接头序列的寡核苷酸，以用作引物从含多聚腺苷酸的 RNA 选择性合成第一链 cDNA。反转录酶到达 RNA 模板的 5‘ 端时，TdT 活性在 cDNA 端增加 1–3 个额外核苷酸，从而在制得的 cDNA 的 3‘ 端完成模板转换并无连接掺入接头序列。SuperScript IV 反转录酶兼具高灵敏度和模板转换效率，可捕获超低丰度的靶标。

在后续 PCR 扩增步骤中，在 cDNA 两端掺入的接头序列可作为引物结合位点，从而完整预扩增全长模板。随附的 Platinum SuperFi U 预扩增预混液含有一种超高保真 DNA 聚合酶，可确保高效扩增长链模板（长达 10 kb）且无 PCR 引起的偏倚或错配。