固定化胃蛋白酶（琼脂糖树脂）

Thermo Scientific Pierce 固定化胃蛋白酶琼脂糖由酸性肽链内切酶（胃蛋白酶）组成，该酶固定在微珠状琼脂糖树脂上用于从抗体中生成和纯化 Fab 和 F(ab')2 片段。

胃蛋白酶是一种在脊椎动物胃粘膜层中以非活性前体形式（胃蛋白酶原）生成的非特异性酸性肽链内切酶。有几种胃蛋白酶，每种分子量为 35,000，最佳 pH 值为 1-3；pH 值为 > 6 时，该酶被永久灭活。胃蛋白酶具有广泛的底物特异性。它优先在芳香族氨基酸（比如苯丙氨酸、色氨酸和酪氨酸）羧基处裂解蛋白。它不会在含有缬氨酸、丙氨酸或甘氨酸的键处裂解。在其他残基处的裂解效率不同。

胃蛋白酶和其他蛋白水解酶用于各种蛋白的实验室分析。胃蛋白酶和木瓜蛋白酶通常用于生成抗体片段。木瓜蛋白酶用于将抗体裂解成含有单个抗原结合结构域的 Fab 片段。胃蛋白酶通过仅去除铰链区以外的 Fc 结构域部分产生 F(ab')2 片段。生成的 F(ab')2 片段包括两个由铰链区二硫化物结合的抗体结合 Fab 片段。

固定化胃蛋白酶可以在任何应用中代替游离胃蛋白酶，且具有优势，因为它几乎无需自溶、消除了蛋白酶样品的污染，还可以通过去除胃蛋白酶来控制酶切。固定化胃蛋白酶还能够更加稳定地抵抗热诱导的变性，从而延长活性维持时间。F(ab')2 制备试剂盒包含固定化胃蛋白酶、其他必要试剂和用于人、兔和小鼠抗体酶切的优化方案。