Thermo Scientific Pierce 重组蛋白 A 琼脂糖是一种固定了基因工程化蛋白 A 形式的微珠状琼脂糖树脂,适用于天然配体会产生不良影响的 IgG 纯化应用。
重组蛋白 A 琼脂糖的特点:
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固定化蛋白 A – 特异性结合多种哺乳动物物种的 IgG,尤其是大多数人和兔 IgG 亚型
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标准容量 – 固定化蛋白 A 上样可提供 15 至 17 mg 人 IgG/毫升树脂的结合容量
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琼脂糖树脂 – 适用于小型色谱柱或批次亲和纯化方法的交联 6% 微珠状琼脂糖
Pierce 重组蛋白 A 琼脂糖使用基因工程化蛋白 A 形式,后者产自
大肠杆菌然后固定在交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 上。虽然已去除一些非必需区域,但重组体在总体大小和 IgG 结合结构域方面与天然蛋白 A 相似。该蛋白具有四个高亲和力结合位点,能够特异性结合多个物种的免疫球蛋白分子的 Fc 区。
重组蛋白 A 产自
大肠杆菌且功能与金黄色葡萄球菌的天然蛋白 A 基本相同。蛋白 A 分子包含四个高亲和力 (Ka= 10^8/mol) 结合位点,能够与包括人和兔在内的多个物种的 IgG Fc 区相互作用
一些研究人员更倾向于使用基于蛋白 A 重组形式的亲和树脂,特别是在实际经验表明不同生产来源(
大肠杆菌与
金黄色葡萄球菌)所引起的非特异性结合较低或内毒素污染水平较低的应用中。另一方面,天然蛋白 A 树脂通常提供更高容量的抗体纯化。
交联 6% 微珠状琼脂糖 (CL-6B) 的特性:•支持 pH 值稳定性:2 至 14(短期);3 至 13(长期)
•平均粒径:45 至 165微米
•排阻极限:10,000 至 4,000,000 道尔顿
•最大体积流速:约 1 mL/分钟(对于 1 cm 直径柱)
•最大线性速度:30 cm/h
• 最大压力:低于 25 psi (1.5 bar);定义为树脂可承受的跨色谱柱最大压降(注:液相色谱装置的指示表压可能测量的是总系统压力,而不是跨色谱柱压降。)
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