Thermo Scientific EZ-Link NHS-LC-生物素是一种长链、NHS 酯活化的生物素化试剂,用于标记伯胺(例如蛋白赖氨酸),其膜通透性使其可用于一般细胞内标记。
EZ-Link NHS-LC-生物素的特征:
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蛋白标记—使抗体或其他蛋白生物素化,以便使用链霉素亲和素探针或树脂进行检测或纯化
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膜可透过性—可用于细胞内部(细胞内)标记
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胺反应性—与伯胺 (-NH2) 发生反应,如赖氨酸 (K) 的侧链或多肽的氨基末端
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不可逆—形成永久性酰胺键;间隔臂不能被裂解
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溶解度—必须溶于 DMSO 或 DMF 中,然后在水性缓冲液中进一步稀释
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中等长度—间隔臂(添加至靶标的总长度)为 22.4 埃;由 6 原子链延长的生物素戊酸基团组成
NHS-LC-生物素为琥珀酰亚胺-6-(生物素酰氨基)-己酸。它是三种相似的 EZ-Link NHS-生物素试剂之一,该试剂能够使溶液中的抗体、蛋白和任何其他含伯胺生物分子实现简单高效的生物素化。只有间隔臂长度不同,三种 NHS 酯试剂可为研究人员提供优化标记和检测实验的可能性,实验中生物素结合的空间位阻是重要因素。由于不带电荷且含简单烷基-链间隔臂,这些生物素化合物具有膜可透过性并且对细胞内标记有用。
我们生产生物素试剂,以确保尽可能使预期研究应用的总体产品完整性、一致性和性能达到最高水平。
生物素 N-羟基磺基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯是广泛采用的生物素化试剂类型。NHS-活化生物素在碱性缓冲液中与伯胺基团 (-NH2) 高效反应,形成稳定的酰胺键。蛋白(如抗体)通常有几种可作为标记靶标的伯胺,包括赖氨酸 (K) 残基的侧链和每个多肽的 N-末端。
生物素各种 NHS 酯试剂在长度、溶解度、细胞通透性和可裂解性方面有所不同。非磺化 NHS-生物素具有细胞渗透性,但必须在有机溶剂(如 DMSO 或 DMF)中溶解。Sulfo-NHS 生物素(和带有聚乙二醇化间隔的生物素)可以直接溶解在水中,但无膜渗透性。含二硫键的各种类型可使用还原剂进行裂解,从而使生物素基团与标记蛋白分离。