Thermo Scientific HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是一种带二价钴电荷的四配位基螯合 Superflow 6 支持相,可专门用于对多聚组氨酸标签蛋白进行高纯度大规模纯化。
HisPur 钴 Superflow 琼脂糖的特点:
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稳健— 高度交联的 6% 琼脂糖 Superflow 微珠状支持相可耐受高达 1200 cm/小时的线性流速,且由于钴离子上结合了四配位基螯合剂而极少发生浸出
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高得率— 在 150 cm/小时线性流速下,每 mL 树脂可结合 20 mg 6xHis-GFP;在某些流速下,结合能力可超过 30 mg/mL 树脂
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高纯度— 钴与组氨酸标签的特异性结合可大大提高洗脱组分的纯度,使得非特异性蛋白的污染率低于 10%
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兼容— 可在各种化学物质和 pH 值环境中保持活性
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高性价比— 本树脂经多次清洗和重复利用后仍保持稳定
HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是一种高度交联的耐用树脂,在中等规模至大规模 FPLC 纯化作业所用流速下不会发生压缩。此树脂在各种化学剂和 pH 值环境下均保持稳定,适用于常见的原位清洁流程。与固定化金属亲和色谱 (IMAC) 所使用的镍及其他配体相比,钴对 His 标签蛋白纯化具有更高的特异性。HisPur 钴 Superflow 琼脂糖与蛋白的特异性结合可提高洗脱组分的纯度,从而省去了额外的纯化步骤。
应用:•多聚组氨酸标签蛋白的大规模 FPLC 纯化
亲和色谱是一种常用的快速简便的重组蛋白纯化方法。在这类纯化方法中,有一种是将多聚组氨酸标签结合到二价金属阳离子上,此金属阳离子则是由固定在磁珠支持相上的螯合剂进行协调。当对 His 标签蛋白进行固定化金属亲和色谱 (IMAC) 纯化时,微珠、螯合剂以及固定金属的类型将会影响这些纯化操作的纯度、得率以及流速性能。
与交联度较低的琼脂糖树脂相比,高度交联的 6% 琼脂糖 Superflow 微珠状支持物可耐受更高的线性流速。本 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖实验方案采用温和的洗涤和洗脱条件,通常可获得纯度大于 90% 的目标蛋白。采用 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖获得的蛋白纯度通常高于镍 IMAC 树脂,这使得 HisPur 钴 Superflow 琼脂糖成为一步纯化的极佳之选。此外,对于那些要求树脂在中等压力水平下不出现压缩的大规模纯化作业,HisPur 钴 Superflow 琼脂糖是理想之选。
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