PEG4-SPDP（聚乙二醇化、长链 SPDP 交联剂）

Thermo Scientific Pierce PEG4-SPDP 是一种通过胺-胺或胺-巯基交联进行蛋白偶联的多功能交联剂（含 4-单元聚乙二醇 (PEG) 基团和一个可还原（可裂解）二硫键）。

PEG4-SPDP 的特点：

•高效胺偶联—NHS 酯 可以有效偶联赖氨酸、肽的 N 末端和其他伯胺
• 可逆巯基偶联—吡啶基二硫基基团能够与还原半胱氨酸和其他巯基基团形成二硫键，提供稳定但可裂解的键
• 聚乙二醇—PEG 基团具有灵活性、非免疫原性、亲水性，通常可增强连接分子的溶解度
• 间隔臂—可连接距离长达 25.7 埃的伯胺和巯基靶标；与 PEG12-SPDP（54.1 埃）相比，

SPDP 类试剂一端含有胺反应性 N- 羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯，另一端含有巯基-反应性 2-吡啶基二硫基基团。PEG4-SPDP 具有 4-单元聚乙二醇间隔臂，与仅具有碳氢化合物间隔的交联剂相比，可以使交联剂和连接蛋白具有更大的溶解度。吡啶基二硫基试剂会产生含二硫化物的键，可使用二硫苏糖醇 (DTT) 等还原剂对其进行裂解。用 SPDP 试剂进行交联实验并不局限于那些涉及蛋白的实验。使用 SPDP 试剂可以修饰或交联任何具有伯胺和巯基基团的分子。

SPDP 试剂通过 NHS 酯与伯胺反应的偶联通常在 pH 值 7 至 8 的磷酸盐、碳酸盐/碳酸氢盐或硼酸盐缓冲液中进行。其他不含伯胺（或硫醇或二硫化物还原试剂—，参见巯基反应性讨论）的缓冲液也很有效。

与巯基反应性吡啶基二硫基基团的反应与胺反应同时进行或在其后进行，在 pH 值为 7 至 8 下效果较佳。反应产生吡啶-2-硫酮取代，其浓度可通过测定 343nm 处的吸光度来测定。反应缓冲液必须不含硫醇和二硫化物还原剂，直至需要淬灭或还原 2-吡啶基二硫基。

产品参考文献：
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