Thermo Scientific Pierce SDA(NHS 双吖丙啶)通过长波长紫外光活化将经过验证的基于 NHS 酯和双吖丙啶的光化学与将含胺分子与几乎任何其他官能团偶联相结合。3.9Å 间隔臂可分离两种光反应性基团。
SDA(NHS 双吖丙啶)的特点:
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膜可透过性—适于
体内细胞内蛋白交联
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异型双功能—NHS 酯基团在 pH 值 7 至 9 时与伯胺反应形成共价酰胺键;采用长波紫外光 (330-370 nm) 活化时,
双吖丙啶(叠氮戊酸)基团可与任何氨基酸侧链或肽骨架发生高效反应
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可控—使用常见的实验室紫外灯活化两步化学交联
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易于使用—这些交联剂在典型的实验室光照条件下具有光稳定性,因此无需在暗处进行实验
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比芳香叠氮化物更佳—双吖丙啶光反应性基团在正常光照下具有比传统光反应性交联剂苯基叠氮化物基团更好的光稳定性,并且长波紫外光可更高效地活化双吖丙啶基团
琥珀酰亚胺-双吖丙啶 (SDA) 试剂是一类新型交联剂,可将经验证的胺反应性化学与一种基于双吖丙啶的创新性、高效光化学相结合用于将含胺分子偶联到几乎任何其他官能团上。SDA 交联剂包括间隔臂长度不同的六种化合物,这些化合物能够切割交联蛋白,存在或不存在用于膜可透过性的带电荷基团。蛋白交联是用于了解蛋白结构和稳定蛋白-蛋白相互作用的重要技术,这些 SDA 试剂可扩展可通过此方法探索的相互作用的效率和范围。
典型的双功能胺或巯基反应性交联剂需要两种蛋白上的正确距离处的特定氨基酸基团(如赖氨酸或半胱氨酸)以捕获蛋白相互作用。SDA 交联剂可通过使用胺反应性 N-羟基琥珀酰亚胺 (NHS) 酯允许特异性标记一种蛋白然后通过凭借连接到另一种蛋白的任何氨基酸侧链或肽骨架上的双吖丙啶部分实现的紫外活化交联避免这一限制。基于双吖丙啶的光交联剂比基于苯基叠氮化物的光交联剂具有更好的光稳定性,并且易于使用长波长紫外光 (330-370 nm) 活化。
可提供多种双吖丙啶交联剂NHS 酯双吖丙啶衍生物(SDA、LC-SDA 和 SDAD)缺乏带电荷基团并且具有膜可透过性。该特性使其适用于细胞内和膜内偶联。相比之下,Sulfo-SDA、Sulfo-LC-SDA 和 Sulfo-SDAD 含有带负电荷的硫酸基团,该基团可提高其水溶性并降低细胞膜可透过性,从而便于它们用于细胞外蛋白交联。SDAD 和 Sulfo-SDAD 还在间隔内具有可通过还原剂切割的二硫键。
•短 (3.9Å) 和长 (12.5Å) 间隔臂类型
• 膜可透过性 (NHS) 和不可透过性 (Sulfo-NHS) 类型
• 不可裂解和可裂解(二硫化物间隔)类型
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