Topoisomerase I(DNA 松弛酶)通过瞬时断裂并重新连接磷酸二酯键,催化去除共价闭合 DNA 的超螺旋圈。Topoisomerase I 在存在 EDTA 时保持活性。
应用:松弛正负超螺旋 DNA (1)。产生 DNA 苷酶异构体 (2)。
来源:从小牛胸腺纯化。
性能和质量测试:脱氧核糖核酸内切酶、3´ 和5´ 外切脱氧核糖核酸酶及磷酸酶分析;超螺旋 DNA 转化为松弛 DNA。
单位定义:一个单位在37°C 下、30分钟内将0.5μg 的超螺旋 Φ X174 RF DNA 催化转换为松弛状态。
单位反应条件:50 mM Tris-HCl (pH 7.5),50 mM KCl,10 mM MgCl2,0.1 mM EDTA,0.5 mM DTT,30 μg/ml/BSA,0.5 μg
Φ X174 RF DNA 和酶,50 μl,30分钟,37°C 下。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。