ERCC ExFold RNA 内参混合物

ERCC ExFold RNA 内参混合物提供一组外部 RNA 对照，可对用于基因表达实验的各种技术平台进行性能评估。向每份 RNA 样品中添加一种内参混合物，并在平台上运行含有内参混合物的样品。然后比较内参混合物数据和已知内参混合物浓度和比值，以评估动态范围、检测下限和平台的倍数变化响应。许多基因表达技术可从 ERCC ExFold RNA 内参混合物的使用中获益，包括下一代测序 (NGS)、微阵列和基于 PCR 的测定。微阵列必须包含用于审查 ERCC 转录本的探针，以从 ERCC ExFold RNA 内参混合物的使用中获益。请咨询阵列生产商以获取详细信息。主要产品特点：

•实现不同基因表达实验间数据比较的标准测定
•测定实验的灵敏度（检测下限）和动态范围
•定量差别基因表达

需要外部 RNA 对照的原因
多种因素，包括起始材料的质量、细胞结构及 RNA 产量的水平、使用的平台以及进行实验的人员，都可能导致 RNA 表达数据的差异。为了控制这些易变性因素，由美国国家标准技术局召集学术、私人和公共组织建立的外源RNA对照物论坛（External RNA Controls Consortium，ERCC）研发了一套通用外部RNA对照物。对照物由一套未经标记的聚腺苷酸化的转录物组成，按照设计，在样品分离后加入到RNA分析实验中，目的是与设定的功能标准进行对照比较。在这种广为接受的标准对照物产生之前，对重要的分析指标进行彻底分析很困难。ERCC ExFold 内参混合物来自信任的高质量 RNA 试剂品牌，是来源于经 NIST 认证的 DNA 质粒且可追溯的92种转录本的市售预配制混合物。该转录本的长度设计为250至 2,000 nt，模拟了天然的真核 mRNA。

解锁 RNA 分析的潜力
包括基因表达谱分析和全转录组调查的 RNA 分析可以更好地了解疾病状态中的表达模式，并对调节细胞结局、发展和疾病恶化的生物学通路及分子学机制提供更深入的了解。传统的RNA分析方法如qRT-PCR和基因芯片技术已经十分完善，但正逐渐被高通量的数字化替代手段即下一代测序方法所取代。由于每种方法都会牵涉多种平台，并且需要对世界各地跨平台的各种样品进行比较，因此需要一种数据比较的标准手段。随着 RNA 分析功能的扩展，创建标准化数据视图的必要性已变得更加重要。

获得结果并进行比较，具有经确认的准确度
ERCC ExFold RNA 内参混合物用于在使用多种样品和平台进行的一项实验中和多项验之间创建 RNA 的标准基线测定值。采用两种内参混合物配方（见图），可以对不同指标（如灵敏度或动态范围）进行检查，以评估一项实验中或不同实验间的不同参数（见图）。而且，两种样品之间表达倍数变化的比值可通过 ExFold RNA 内参1和 ExFold RNA 内参2（如图所示）之间高度一致的关系来计算，具有很高的置信度。由于内参混合物中各种转录本的摩尔浓度已知，使用92种转录本的4种亚群的不同比值的组合对两种混合物进行关联，即可确定测量值。这些对照品是下一代测序实验（如 SOLiD™ 系统）和支持的微阵列平台（如 Illumina™ Sentrix™ BeadChip）的理想选择。

ERCC 试剂盒配置选项灵活
无论测定动态范围或基因表达倍数变化，ERCC 内参对照混合物有两种试剂盒配置可满足您的实验需求。使用ERCC Spike-In混合物确定您在用平台的动态检测范围和检测低限，并使用ERCC ExFold Spike-In混合物评估基因表达差异测定结果的精确性。

	ERCC RNA 内参混合物1*	ExFold 内参混合物1*	ExFold 内参混合物2*	Nuclease-free水
ERCC RNA 内参混合物（货4456740）	10 µL	—	—	1.75 mL
ERCC ExFold RNA 内参混合物（货4456739）	—	10 µL	10 µL	1.75 mL

* 尽管 ERCC RNA 内参混合物1和 ExFold 内参混合物1中包含的 ERCC 转录本配方相同，但 ERCC RNA 内参混合物1不能取代 ExFold 内参混合物1进行倍数变化评估。仅可使用生产批号相同的 ExFold 内参混合物1和混合物2。