RapidFinder™ STEC 筛选试剂盒

Applied Biosystems™ RapidFinder™ STEC 筛选试剂盒是全面的、经过验证的筛选和确认工作流程的一部分，该流程能够对多种牛肉制品中的产志贺毒素大肠杆菌 (STEC) O157:H7 和 Big 6 非-O157:H7 血清组（O26、O45、O103、O111、O121 和 O145）进行 TaqMan™ 实时荧光定量 PCR 检测。RapidFinder STEC 筛选试剂盒是与 USDA-ARS 联合开发，包含 96 个完整 qPCR 检测，旨在筛选是否存在志贺类毒素 1 和 2 (stx1/stx2)、eae 以及潜在的 O157:H7。这款检测试剂盒包含了所有已知 stx 和 eae 等位基因变体，包括 stx2g 和 stx2f。所有反应均包含内部阳性对照 (IPC) 和 ROX™ 惰性参比。若样品被评估为阴性，则无需进一步检测。若样品被评估为阳性，必须使用 RapidFinder™ STEC 确认试剂盒进行进一步检测。

RapidFinder STEC 检测工作流程的特点如下：
•结果更加可靠—经验证工作流程的一部分，可检测样品中低至 1-5 CFU 的致病性 STEC
• 简化的工作流程—采用可匹配至您现有检测项目的封闭管、单步冻干检测法，可同步检测 375 g 牛肉样品中的大肠杆菌 O157:H7 和 Big 6 非-O157:H7 菌株
• 减少伪结果的几率—通过使用高品质 DNA 制备、专有检测设计以及内部阳性对照
• 可当天检测致病性 STEC 并在 12 小时内清除 STEC 阴性牛肉样品，从而支持早期产品放行
• 极大程度地降低成本并减小实验室空间，只需使用较少量的非专有单步培养基，无需购买专有培养基
• 与 RapidFinder™ Express v.1.2 以及更高版本软件兼容—轻松实现易用、自动化的存在/不存在检测并对结果进行解读

研究表明，RapidFinder STEC 检测试剂盒对大肠杆菌 O157:H7 和 Big 6 非-O157 STEC 菌株具有较高的灵敏度和特异性。它们可检测所有包含菌株，并显示与任意所检测的排除菌株无交叉反应。Stx 检测试剂盒可检测 stx1 和 stx2 所有已知变体，包括 stx2f 和 stx2g。与 USDA-ARS 联合开发的优化工作流程显示出与 MLG 参考方法同等的检测效果，两种检测中的内部阳性对照均显著降低假阴性风险。

应用
RapidFinder STEC 检测工作流程预计供对牛肉样品进行 STEC 检测的微生物分析员使用。RapidFinder STEC 筛选试剂盒和确认试剂盒与 Applied Biosystems 7500 Fast 仪器包搭配使用，可为快速检测、鉴定和确认 Big 6 STEC 和大肠杆菌 0157:H7 提供全面的解决方案，从而满足肉牛行业进出口要求。具体工作流程详见下图，包括对牛肉样品中大肠杆菌 O157:H7 和 Big 6 非 -O157 菌株进行自动且基于离心柱的 DNA 分离和实时荧光定量 PCR 检测。

RapidFinder Express 软件
当整合到 RapidFinder STEC 检测工作流程中时，RapidFinder Express 软件自动进行数据解读并生成样品处理方法的用户说明。数据显示适用于新用户和高级用户，通过 7500 Fast 系统 SDS 软件显示简单的存在/不存在调用或原始数据文件。

RapidFinder STEC 筛查和确认测定符合 USDA FSIS 指南
RapidFinder STEC 检测工作流程（两阶段实时荧光定量 PCR 方法）旨在按照美国农业部食品安全监督服务局 (FSIS) 对美国牛肉行业中掺杂剂的规定准确检测、识别并确认是否存在大肠杆菌 O157:H7 和 Big 6 非 O157 血清组产志贺毒素大肠杆菌。

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*Swimley, Michelle S. Design and Evaluation of Two-Stage Multiplex Real-Time PCR Method for Detecting O157:H7 and non-O157 STEC Strains from Beef Samples.IAFP 2015.