Dynabeads 体外转录和 RNA 纯化试剂盒提供了一种创新技术,可实现简单、灵活、自动化的 mRNA 生产,特别适合需要高质量和扩展性的情况,如 RNA 疫苗和疗法开发的发现阶段。这种自动化解决方案可以帮助加速筛选数百种构建体,这些构建体可以用于确定最终的候选药物,并且数量可扩展以满足您的需求。
Dynabeads 体外转录和 RNA 纯化试剂盒的特点包括:
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灵活——为 IVT 选择 DNA 模板,设计和扩增具有更大的灵活性
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高效——重复使用 DNA 模板和磁珠(至少 6 次),以降低成本,并消除或尽量减少质粒制备的手动操作时间,降低细菌宿主 DNA 转移的风险
• 可扩展——在手动和自动化工作流程之间切换,以满足所需的规模(mRNA 量从微克到克)和通量
• 质量——确保磁珠的安全灵活供应,以便从基于 RNA 的药物发现研究到商业化生产,都能使用对应的解决方案(通过OEM 商业供应),不会因转换技术或原材料而耗费额外的时间或成本
工作流程概述
生物素化模板的制作方法是使用生物素化正向引物和非生物素化反向引物(见下图),对质粒构建体或合成 DNA 构建体的靶标序列进行 PCR 扩增。作为 PCR 扩增的替代方案,如果质粒设计正确,则可以通过 5' 悬垂序列中的生物素-dUTP 填充反应对线性化质粒进行生物素化。然后,生物素化模板直接固定到用于体外转录的 Dynabeads 链霉亲和素磁珠上,而无需提前纯化。直接在 IVT 中使用与磁珠结合的模板,然后通过磁性分离从合成的 mRNA 中去除。该模板可以在连续 IVT 反应中重复使用(至少 6 次)(见下图)。
固相 IVT 可与 MEGAscript T7 转录试剂盒、mMESSAGE mMACHINE T7 转录试剂盒和 mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA 转录试剂盒等常用试剂兼容,可根据您的需求和策略进行加帽和聚腺苷酸化。
将 IVT 步骤产生的 RNA 粗产物与产品中包含的用于 RNA 纯化的 Dynabeads 羧基磁珠混合,并加入产品中包含的 Dynabeads RNA 结合缓冲液。RNA 结合到磁珠表面,反应混合物的剩余组分通过使用磁力架(见
thermofisher.cn/magnets)及丢弃上清液去除(见下图)。
可与 KingFisher 自动纯化系统配合使用
1 μm 磁珠非常适合高通量筛选。该过程可以使用移液工作站或任何
KingFisher 样品纯化系统 自动进行。KingFisher 仪器自动化可以在 4 小时内实现 96 份样品的 IVT 模板固定化、IVT 反应和纯化,每个板孔的 mRNA 产量高达 5 mg。KingFisher Flex 和 KingFisher Apex 自动纯化工作流程的程序可以从我们的网站获取。
商业化供应 如需了解更多符合 GMP 的 mRNA 疫苗和药物生产的对应产品和支持文件,请访问:
thermofisher.cn/dynabeadsmrna.