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Exonuclease VII
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Exonuclease VII
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70082Z1000UN
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Exonuclease VII 是一种严格的单链定向酶,具有 5'→3' 和 3'→5' 核酸外切酶活性,这使其成为唯一具备单链特异性的双向核酸外切酶。Exonuclease VII 对二价阳离子无明显需求,因其在 EDTA 存在时具备完全活性。初始反应产物是酸不溶性寡核苷酸,其进一步水解成酸可溶形式。限制性酶切的产物为小型低聚体(从二聚体到十二聚体)。
特性:
分子量:xseA 亚单位 = 51.8 kDa;xseB 亚单位 = 8.8 kDa
最适温度:37°C
最适 pH 值:8.0
失活:95°C,持续 10 min。
纯度:
经 SDS-PAGE 确定高于 95%。已检测污染性核酸内切酶、双链核酸外切酶和核糖核酸酶。
储存缓冲液:
50 mM Tris-HCI(pH 值 8.0)、200 mM NaCl、0.5 mM EDTA、10 mM DTT、50% 甘油。
测定条件:
反应 (50 μL) 包含 50 mM Tris-HCl(pH 值 7.9)、50 mM 磷酸钾(pH 值 7.6)、8.3 mM EDTA、10 mM 2-巯基乙醇、变性 DNA 和酶。
单位定义:
一个单位是指催化 1 nmoL 核苷酸转化为酸溶性核甘酸所需的酶量(标准测定条件、30 min 内、37°C 下)。
浓度:
10 个单位/μL
来源:
大肠杆菌
菌株(包含编码 Exonuclease VII 的大型 (xseA) 和小型 (xseB) 亚单位的高产克隆)。
方案:
典型反应条件 (50 μL)
70 mM Tris-HCI、pH 值 8.0
8 mM EDTA
10 mM 2-巯基乙醇
1 μg DNA
50 μg/mL
0.2 个单位 Exonuclease VII
在 37°C 下孵育 30 min。在 95°C 下加热 10 min 使酶失活。注意 Exonuclease VII 不受 EDTA 抑制。
注意:与 Exonuclease VII 配合使用的一种典型稀释缓冲液为 50 mM Tris(pH 值 7.9)、1 mM DTT 和 0.5 mg/mL 乙酰化 BSA。
应用:
1.基因组 DNA 中内含子的映射位置。
2.使用聚(dA-T)尾从插入片段中去除载体 DNA。
3.去除过量 PCR 引物。
4.去除限制性核酸内切酶产生的单链突出端。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
酶
核酸外切酶
兼容缓冲液
储存缓冲液
数量
1000 U
产品类型
Exonuclease VII
Unit Size
1000 units
内容与储存
置于干冰上运输。保存于 -20°C。
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