蓝载体蛋白和随附的 Thermo Scientific EDC 偶联试剂盒是源于软体动物的高可溶性血蓝蛋白包,能够使用胺基肽或羧基肽抗原简单制备高效免疫原。
Imject EDC Blue Carrier 蛋白离心试剂盒的特点:
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便利的试剂盒—含有冻干蓝载体蛋白(MES 缓冲液中)、EDC 交联剂和辅助组分,可轻松制备用于注射的即用型免疫原
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高得率偶联—CCH 的每个分子包含数百个通过 EDC 或 NHS 酯交联剂进行半抗原偶联的伯胺
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质量经验证—免疫原性载体蛋白经过特殊纯化,可确保一致的化学结构和溶解度从而具有一致的性能
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优越的溶解度—与 KLH 相比,蓝载体蛋白具有更高的溶解度,从而可用于范围更广的偶联方案,适应不常见或溶解性很差的半抗原
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高免疫原性—提供与钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH) 基本相同的免疫原性和系统发育距离水平
蓝载体蛋白是
似鲍罗螺血蓝蛋白 (CCH) 的一种纯化制剂,在抗体生产程序中使得注射和免疫接种用偶联抗原具有高免疫原性。该大蛋白与常见载体蛋白钥孔血蓝蛋白 (KLH) 具有相同的免疫原性。不过,其溶解度比后者更好,在使用经典的交联剂例如戊二醛,Sulfo-SMCC 和 EDC 交联肽段、蛋白质和其他半抗原时,它对于缓冲液和 pH 值提供弹性的选择,使免疫原制备方案具有更大的灵活性。随附的 Thermo Scientific Imject EDC Blue Carrier 离心试剂盒可实现轻松免疫原制备。
Blue Carrier 蛋白的特性:•
其他名称:似鲍罗螺血蓝蛋白、CCH
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分子量:全分子:∼ 8,000,000;亚单元:∼ 400,000和 ∼ 350,000
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吸收:最大 280 nm、350 nm 和 558 nm
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消光系数(1 mg/mL 溶液吸光度):280 nm 处 1.4;346 nm 处 0.35
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A280/A350 比值:∼ 4.0
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铜/蛋白比:∼ 16 Cu
2+/蛋白分子
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等电点:6.0
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溶解度:可溶于水性缓冲液:pH 值 7.0-8.0
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稳定性:在水性缓冲液中保持稳定:∼ pH 值7.2,不含 Ca
2+ 或 Mg
2+载体蛋白是能够在注射后刺激免疫应答的大型复杂分子。成功的生产特异针对小抗原的抗体(例如:肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价交联于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够达到足够水平的半抗原-载体偶联,选择载体蛋白。
Blue Carrier 蛋白是源自软体动物
似鲍罗螺的经过特殊纯化的血蓝蛋白。CCH 蛋白由2个非常大的多肽亚单元 (404/351 kDa) 构成,这两个亚单元即使在不存在二价阳离子的情况下也能形成极为稳定的异源双十倍体结构。(与此相反,KLH 则具有一个不太稳定的可溶性同双十倍体结构)。CCH 亚单位的复杂分子排列包含多种重复抗原结构,这些结构可引发由 T 和 B 淋巴细胞介导的强免疫反应。
由于较大尺寸和分子的复杂性,KLH 和 CCH 血蓝蛋白是作为免疫原用于产生半抗原和肽抗体的首选载体蛋白。此外,研究表明,血蓝蛋白引发的人类和动物的强 DTH 免疫应答对某些类型的癌症存在有益的治疗效果。癌症免疫治疗的新进展正是利用血蓝蛋白的独特免疫原性特性优势开发用于治疗新发疾病的新型结合疫苗。
碳二亚胺交联剂
EDC 将含羧基半抗原(例如,肽抗原的 C 端)偶联到 BSA 载体蛋白上。这种免疫原制备的方法最适用于主序列中央区域含有较少或不含天门冬氨酸残基、谷氨酸残基(羧酸盐)和赖氨酸残基(伯胺)的肽抗原。由于肽含有羧酸盐和胺,EDC 偶联可使其形成各种聚合物,并在交联的载体蛋白上呈随机取向。通常情况下,这样可令载体蛋白上呈现高水平的抗原装载量,并且各个方向上均可诱导抗体产生。不过,抗原肽序列内的重要(所需的)抗原表位区域如果含有伯胺(赖氨酸残基)或羧酸盐(天冬氨酸和谷氨酸残基),该表位可能被 EDC 介导的偶联所阻断。在这种情况下,可以使用同源双官能团胺-反应性交联剂与磷酸盐缓冲液中的纯化蓝载体,或用独特的末端半胱氨酸合成肽以及
马来酰亚胺活化蓝载体试剂盒来制备载体蛋白偶联物。
更多产品数据•
免疫原制剂的载体蛋白活化和偶联数据相关产品Imject™ Blue Carrier™ 蛋白(无菌 PBS 中)Imject™ Blue Carrier™ 蛋白