Thermo Scientific N-PER 神经元蛋白提取试剂是一种经优化可从神经元组织和原代培养神经元的所有细胞区室中高效提取蛋白的专有细胞裂解试剂。
N-PER 神经元蛋白提取试剂的特点:
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经优化—可从脑组织或原代培养神经元中高效提取总蛋白(包括膜蛋白)
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温和—可保留蛋白功能而不影响得率
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通用—可补充蛋白酶抑制剂、还原剂或螯合剂或所需辅因子
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兼容—提取适合与总蛋白、酶和免疫学测定以及蛋白纯化方法配合使用
使用 N-PER 试剂制备的神经元细胞裂解物(如脑组织提取物)适用于酶活性测定(例如磷酸酶、激酶、ATPase 测定)、免疫检测(例如 Western 印迹、ELISA、RIA)和蛋白纯化。N-PER 裂解试剂能够在不到 30 分钟内完成蛋白提取,并需要对组织进行机械破碎(例如,杜恩斯均质化,Polytron)。典型神经元蛋白得率为 70-90 μg 蛋白/mg 脑组织或 300 μg 总蛋白/10
6 个原代神经元细胞。
应用:•从神经元组织或原代神经元细胞中分离功能蛋白
•研究特定于神经元组织的酶活性测定
•制备神经元组织的裂解物以进行生物标志物分析
典型神经元结构包括细胞体、树突和轴突。神经元细胞膜的独特形态和丰富的鞘脂和胆固醇成分在制备神经元蛋白提取物时带来挑战。N-PER 神经元蛋白提取试剂专为克服从脑或其他神经元组织和原代培养神经元中提取功能性天然蛋白所面临的挑战而配制,同时提高了相对于其他提取方法的蛋白得率。
N-PER 细胞裂解试剂的温和配方适用于需要活性神经元蛋白的下游应用。此外,N-PER 试剂可与许多应用兼容,包括酶测定(例如,磷酸酶、激酶)、免疫检测、各种色谱程序和电泳。Thermo Scientific Halt 蛋白酶抑制剂混合物可在临用前添加,以防止蛋白水解或针对脑组织中通常存在的高磷酸酶活性提供额外保护。
对于每次提取,建议采用的比值为 1 g 组织:10 mL N-PER 试剂或 0.5-1 mL N-PER 试剂/10 cm 皮氏培养皿原代培养细胞。
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