Thermo Scientific Syn-PER 突触蛋白提取试剂是一种专有的细胞裂解试剂,用于从神经元组织和原代培养神经元中高效分离含功能性突触蛋白的突触体。
Syn-PER 突触蛋白提取试剂的特点:
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高效提取突触—获得高达 10 µg 突触蛋白/毫克神经元组织或 4 µg 突触蛋白/35 mm 培养皿原代培养神经元(10
6 个细胞)
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温和配方—可分离活的突触体;然后裂解这些突触以提取天然突触蛋白并保持磷蛋白完整性
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快速程序—在不到一小时内获得完整突触的突触体悬浮液
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简单的方案—无需超速离心步骤
Syn-PER 突触蛋白提取试剂的应用:•分离功能性突触体以研究神经递质释放
•提取突触前和突触后蛋白,以识别蛋白组成和突触功能的变化
•保存并研究与突触相关的不稳定或短暂的蛋白磷酸化事件
Syn-PER 试剂用于制备含具生物学活性的突触前和突触后蛋白的突触体(即完整的膜和突触蛋白复合物)。当与新鲜神经元组织或原代培养神经元配合使用时,使用 Syn-PER 试剂制备的突触体可用于研究突触传递。这些提取物中包含的突触体蛋白也可用于下游应用,如 Western 印迹、免疫沉淀、酶活性测定和蛋白-蛋白相互作用研究。Syn-PER 突触蛋白提取试剂可尽可能减少磷蛋白降解,适用于需要保持磷蛋白完整性的研究。
Syn-PER 突触蛋白提取试剂可高效富集突触体内的突触前和突触后蛋白,且得率较高。非变性细胞裂解试剂可与许多下游应用兼容,包括神经递质释放测定、酶测定(例如,磷酸酶、激酶)、免疫检测、各种色谱程序和电泳。此外,即使在不存在磷酸酶抑制剂的情况下,与大多数市售提取缓冲液相比,Syn-PER 试剂也可更好地保持磷蛋白完整性。Syn-PER 试剂不含蛋白酶或磷酸酶抑制剂。然而,抑制剂(如 Thermo Scientific Halt 蛋白酶和/或磷酸酶抑制剂)可在临用前添加,以防止蛋白水解或针对脑组织中通常存在的高磷酸酶活性提供额外保护。
突触体是在神经组织均质化过程中产生的孤立神经末梢。突触体制剂可用于提取突触前和突触后蛋白,因为其含有完整的突触前末梢(包括线粒体和突触囊泡)以及突触后膜和突触后致密区。突触体通常用于研究突触功能,因为其含有功能性离子通道、受体、酶和完整的突触囊泡,可吸收和释放神经递质。突触体制备通常涉及多个超速离心步骤和密度梯度,以将该细胞部分与其他细胞器分离。
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